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尚辅网 尚辅网 项目14 碳酸饮料中食品添加剂含量测定 14.1高效液相色谱法 液相色谱是以液体为流动相的一种色谱分离方法。根据固定相的不同,液相色谱可分为液固色谱和液液色谱,前者是以固体为固定相,后者是以液体为固定相。 高效液相色谱 高效液相色谱的特点 高压:对液体流动相施加了很高的压力,克服阻力使得载液能迅速通过色谱柱 高速:由于采用了高压,载液流速加快,分析时间变短 高效:色谱柱的效率高 高灵敏度:最小检测量可达10-9g 适用范围广:可用于高沸点、不能气化的、热不稳定的,80%的有机物在原则上都可以采用高效液相色谱分析。 14.1.1高效液相色谱仪结构 高压输液系统 进样系统 分离系统 检测系统 高压输液系统 高压输液系统的核心部件是高压输液泵。高压泵的作用是输送流动相,由于色谱柱的阻力很大,所以高压泵必须能克服阻力以恒定流速输送载液。 进样系统 常用的进样系统有3种:直接进样、停留进样阀和六通阀进样。其中最常用的是六通阀进样。 分离系统 分离系统的主要元件是色谱柱,是色谱分离过程中存放固定相的场所。 高效液相色谱柱一般为不锈钢合金材料的元件,对于大多数液相色谱流动相,不锈钢有足够的耐腐蚀性。 液相色谱柱比气相柱短, 10-30cm 检测系统 常用检测器有 紫外吸收检测器 二极管阵列检测器 示差折光检测器 化学发光检测器 荧光检测器 14.1.2高效液相色谱分析原理 高压泵将贮液罐的载液经进样器送入色谱柱中,然后从检测器的出口流出。当欲分离样品从进样器进入时,流经进样器的流动相将其带入色谱柱中进行分离,然后依先后顺序进入检测器,记录仪将进入检测器的信号记录下来,得到液相色谱图。 14.4定性与定量分析14.4.1定性方法 (1)利用已知标准样品定性 (2)利用检测器的选择性定性 (3)利用紫外检测器全波长扫描功能定性 14.4.2定量方法 (1)归一化法 (2)外标法 (3)内标法 * * 尚辅网 尚辅网 尚辅网 尚辅网 尚辅网 尚辅网 尚辅网 尚辅网 尚辅网 尚辅网 尚辅网 *
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