四氮大环铜配合物和DNA的相互作用.pdfVIP

维普资讯 一 第 朗 、Ol_ 【3．No 4 997年 12月 Dec ．1997 四氮大环铜配合物和0D6NA／自2勺相／互作点用02 周井炎* 李庆祥、／刘长林 徐辉碧 (华中理I大学化学糸，武汉 430074) 本文台成了四氮夫环铜配台 物，以紫外和溴化乙锭荧光法研究了它和DNA的相互作用，tg．琼 脂糖凝胶 电泳就它作为化学棱酸酶的可能性进行了初步研究 关键词： 粤塾 酲宣堑 ． 紫外光谱 溴lt己锭荧光法 化学桉酸酶 0 前 言 在生理条件下借助于氧化或光活化显示出与天然核酸酶相同或类似生物活性的过渡金属 配台物及其载体衍生物称为化学核酸酶 ]，有报遭 ，四氮大环铜配台物为有抗艾滋病活性的化 合物 ，我们参考有关文献台成大环配体 ，用它与铜离子反应形成终产物，台成了四氮大环 锅配台物(下称大环铜配合物)通过紫外、荧光光谱研究了大环铜配台物和 DNA的相互作用， 并用琼脂糖凝胶 电泳观察到了大环铜配台物的化学核酸酶性质，这将为大环铜配合物的药物 应用提供有用的参考资料。 1 实验部分 1．1 仪器和试剂 1．1．【仪器 紫外可见分光光度计 (日本岛津 uV一240型) 荧光分光光度计 (日本岛津RF一540型) 电泳仪 (北京六一仪器厂) 紫外反射透射分析仪 (上海康华生化仪器制造厂) 电子 自旋共振仪(日本JEOL，dES—FE3XG) 1．1．2 试剂 · DNA溶液 (0．38~lg／mL)、 DNA—Ecorl溶液 (0．5~tg／raL)华美公司产 品，CTDNA，Sigma 产品．其他均为国产分析纯试剂，实验用水为二次蒸馏水。 收穑 日期：l996】028。 收修改稿 日期：199 0721 画家 自然科学基金资助课题 ·通讯联系人 第 作者 周井篼，男，57岁，教授 ．研究方向：生物无机化学 维普资讯 第 期 四氰大环铜配合物和 DNA的相互作用 -39l· 1．2 实验方法 1．2．1 大环铜配合物的制备 1．2．1．] 制备大环配体 5，7，7，】2，14，1d六 甲基一【．4，8．1l四氮杂环 十四一4．】1二烯二 碘化氢 0．2mol乙二胺与 10ml甲醇在冰浴混合后，缓慢加入 0．2mol氢碘酸 ，再加入 30ml丙 酮，在冰浴中进一步冷却 放置数小时或过夜，可析出白色晶体，抽滤并用少量丙酮洗涤数次． 可得到配体 。 1．2．1．2 制备大环铜配合物 0．01mol配体与 0．01mol乙酸铜在加热 !、§r『]l 回流状态下完全溶解在约 40ml甲醇中，然后 加入配体、继续加热搅拌 1小时，趁热过滤后 在承浴 中加热浓缩至晶体开始形成 ，然后放在 l八J 冰浴中冷却 1小时或更长时间，抽滤可得紫色 的大环铜配合物 ．所得的配合物在无承乙醇中 图 l 大环铜配台物的结构 重结晶(太环铜配合物的结构见图 1)。 Fig．1 Structureofmacroeycli~coppercomplex 1．2．2 DNA溶液的配制 紫外测定用DNA溶液用柠檬酸一氯化钠缓冲液配制(pH一7．O)，荧光测定用DNA溶液用