番茄泛素蛋白基因LeEBF1和LeEBF2的克隆表达分析.pdfVIP

第28卷 第6期 植 物 研 究 2008年 11月 Vo1．28 No．6 BULLETIN OFBOTANICAL RESEARCH NOV．， 2008 番茄泛素蛋 白基因LeEBF1和LeEBF2的克隆表达分析 龙皎月 胡宗利 陈绪清 严 波 陈国平 (1．重庆大学生物工程学院，重庆 400030) (2．北京市农林科学院北京农业生物技术研究中心，北京 100089) 摘 要 通过RACE和 RTPCR方法从番茄中克隆了 肋F1(EIN3bindingF—boxprotein1)和 LeEBF2(EIN3bindingF—boxprotein2)的全长cDNA序列，两个基因 衄F1、LeEBF2全长分别是2 866和2891bp，对序列的分析表明，它们的开放阅读框分别是 1911和 1995bp，编码区编码637 和665个氨基酸残基，在氨基端含保守的F—box区域和在羧基端有 l4个亮氨酸重复单位，通过 BLAST软件和DNAMAN分析表明这两个基因的氨基酸序列与拟南芥EBF1和EBF2有58．6％相 似，同时又与其他物种的EBF蛋 白的F．box区域比较有24．4％到73．2％的相近。Northern杂交指 出：LeEBF1与LeEBF2在野生型和Ⅳr的幼叶中的表达量高于成熟叶；当在果实发育期，LeEBF1与 LeEBF2在青果期的表达量相比其他时期要弱。初步结果表明，LeEBF1与LeEBF2可能在番茄的 生长发育中起着重要的作用。 关键词 LeEBF1；LeEBF2；番茄；泛素途径 中图分类号：$641．2 文献标志码 ：A 文章编号：1673—5102(2008)06—0710—06 MolecularCloningandCharacterizationofLeEBF1nadLeEBF2from Tomato LONGJiao．Yue HUZong．Li CHENXu。Qing， YANBo CHENGuo．Ping。 (1．CollegeofBioengineering，ChongqingUniversity，Chongqing 400030) (2．BeijingResearchCenterofAgro—biotechnology，Beijing 100089) Abstract Twofull—lengthcDNAsofLeEBF1(EIN3bindingF—boxprotein1)andLeEBF2(EIN3bind— ingF—boxprotein2)wereclonedfromtomato(Sotanumlycopersicum)byRT—PCRandrapidamplifica— tionofcDNAends(RACE)．Theywere2866and2891bp，withopenreadingframe(ORF)of1911 bpand1995bp，encoding637and665aminoacids，respectively．PutativeLeEBF1andLeEBF2pro— teins，eachcontainingawell—conservedF-boxmotifintheaminoterminusand14tandem leucine—rich repeats(LRRs)inthecarboxylterminus，shared58．6％ ofidentitywitheachother．Identitieswith otherspeciesEBFproteinswithinFboxmotifrangedfrom 24．4％ to73．2％．Northernblotanalysisre。 sultsindicatedthattheexpressionlevelsofLeEBF1andLeEBF2inyoungleaveswerehig