PDCD4在胃癌组织中的表达与临床病理学意义.pdfVIP

盂宪民基金会首届学术讨论会暨第十二届全国普外基础与临床进展学术大会普外进展论坛 组织具有各自特征性的傅立叶变换红外光谱谱图。本研究方法采集的FTIR可以反映胃组织 中蛋白质、磷脂和核酸等生物大分子的含量和构像的变化，根据其特征性的FTm谱图变化， 对组织样品进行光谱学诊断，可确定组织细胞的病理状态。胃镜样品的图谱特征揭示了Fr瓜 技术与内窥镜结合应用于临床在体原位无损检查的可行性。 PDCD4在胃癌组织中的表达及临床病理学意义 口／中国医科大学附属第一医院普外二科 马 刚 刘 江张 浩 尾崎岩太松桥幸子郑新宇 董 明 郭克建 【摘要】目的探讨胃癌组织中PDCD4的表达及其临床病理学意义。方法应用免 疫组织化学和Western印迹杂交研究方法检测61例胃癌组织中PDCD4的表达，观察其与胃 癌临床病理学参数之间的关系。结果61例胃癌中，PDCD4低表达者占65．6(40／61)，高表 达者占34．4(2l，61)o相关分析显示，PDCD4表达缺失或下调与肿瘤的不良分化相关(P 0．叭)，而与性别、年龄、肿瘤的TNM分期无关。结论PDCD4蛋白在胃癌中多呈低表达， 并与胃癌的分化程度有关，在胃癌的发生、发展过程中起重要作用。 胃癌的发生是一个复杂的多阶段生物学过程，受细胞内多个肿瘤相关基因的调控，其发 生和发展机制尚未阐明。细胞的增殖和凋亡与肿瘤的关系一直是肿瘤研究中的热点。研究发 现，细胞凋亡抑制在肿瘤发生和发展中占有重要地位。最近有研究表明PDCD4(Programmed Cdl Death，PI)CD4)是一个新发现的与细胞周期及凋亡相关的抑癌基因，肺癌组织中PI砌D4 的表达明显下降或缺失，并与肺癌的恶性程度及不良预后有关。然而PI)CD4在包括胃癌在 内的多种肿瘤中的表达情况国内外尚未见报道。本研究应用免疫组化和Westem印迹杂交检 测PDCD4蛋白在胃癌组织中的表达情况，探讨其与肿瘤的分化程度、病理分期等临床病理 学参数之间的关系。 材料和方法 一、临床资料收集我院2000年1月一2000年12月手术切除的胃癌标本61例，其中 26例同时保存癌旁正常组织作为对照研究。每例标本经10％福尔马林固定，石蜡包埋，切成 盂宪民基金会首届学术讨论会暨第十二届全国普外基础与临床进展学术大会普外进展论坛 49m厚连续切片备免疫组化和病理分析用。其中有5例胃癌及癌旁正常组织标本在手术切除 后立即取样，置液氮中冷冻保存。61例患者中，男29例，女32例，年龄36—78岁，平均 (60．0±11．1)岁。分化程度：高分化腺癌13例，中分化腺癌22例，低分化腺癌26例。根 Ⅳ期9例。所有患者术前均未接受放疗和化疗。 主要试剂兔抗人PDCD4多克隆抗体由日本佐贺大学医学部代谢内分泌研究室松桥幸 子教授惠赠。即用型S-P试剂盒、3，3’一二氨基联苯胺(DAB)试剂盒均购自福州迈新公司。 二、免疫组化检测PDCD4蛋白表达采用S-P免疫组化方法，按试剂盒说明书进行操 作。结果判定：细胞浆的棕黄色颗粒着色为阳性结果。每张切片由2名病理科医生双盲计数 达。 三、Western印迹检测PDCD4蛋白表达按下述方法提取冷冻保存的5例胃癌及癌旁 正常组织的蛋白质。适当体积裂解缓冲液。超声裂解组织45秒，4。C15000r／rain离心20rain， 收集上清-70‘c保存。BCA定量试剂盒测定蛋白浓度。 四、统计分析采用SPSSl2。0统计软件包进行统计学处理。计数资料分析应用配对t 2检验。 检验；PDCD4表达与胃癌临床病理学指标间的相关性应用x 结果 ’ 一、PDCD4蛋白在正常组织和胃癌中的表达 1．Western印迹分析结果 通过Western印迹法检测了5例配对的胃癌及癌旁正常组织的PDCD4蛋白表达情况。 如图lA所示，同癌旁正常组织相比，所有胃癌组织PDCD4蛋白表达均明显下调或缺失。经 与g-actin相对光密度值扫描分析比较，癌组织中PDCD4蛋白条带的吸光度值明显低于癌旁 正常组织(P0．01)，具有统计学意义。说明胃癌组织中PDCD4表达明显下降，低于正常组 织。 2．免疫组化染色结果 免疫组化染色显示，在正常胃组织中，阳性细胞比例均在80％以上。在61例胃癌组织 一184— 盂宪民基金会首届学术讨论会暨第十二届全国普外基础与临床进展学术大会普外进展论坛 中，PDC