小窝蛋白-1和门静脉高压的关系.pdfVIP

小窝蛋白一1与门静脉高压的关系 唐志鹏1’刘平2’王宪波2’徐列明2’ 陆雄2’刘成海2’胡义扬2’顾宏图2’刘成2’ 1)．上海中医药大学附属龙华医院消化科 2)上海中医药大学肝病研究所附属曙光医院肝硬化科 摘要 性染色。至造模4w时阳性染色最强。停止造模后Car一1阳性染色逐渐减弱，但8w时阳性染色仍稍强于正 诱导大鼠肝硬化过程中，肝窦内皮细胞Cav一1表达上调，可能是形成门静脉高压的主要发病机制之一。 关键词小窝蛋白一1 门静脉高压肝窦内皮细胞肝硬化大鼠 在肝硬化门静脉高压的发病机制研究中，肝窦内皮细胞(SECs)的功能紊乱日益受到重视。已知实验性 关系。 1．材料与方法 1．1材料 Crus 式会社产品，lot．MAI，05。兔抗Cav一1多克隆抗体，Santa Anti—RabbitDetection Inc公司产品，1。ot： 织化学Two—StepTM Reagent(HRP)，AntibodyDiagnostica Lab生理数据处 Inc公司产晶，I，ot：0203。Power 0201。液体DAB酶底物显色试剂盒，AntibodyDiagnostica 影像工程公司产品。 1．2方法 DMN 1次，共4w。模型大鼠分 10rag·kg“剂量(用生理盐水稀释)处理动物，腹腔注射，每w连续3d，每d 鼠和3只正常对照大鼠。 定，打开腹腔，暴罐门脉主干，采用游标卡测量距肝门0．5cm处的门静脉直径；于肠系膜前静脉右侧靠近门 脉处分离出一回肠肠系膜静脉分支，结扎其远端，然后用血管剪剪开一适宜缺口，将PE—100导管自缺口插 入后，沿肠系膜前静脉上行，通过脾静脉至门脉主干，固定导管并接通压力换能器，经PowerLab生理数据 ·327· 处理和分析系统获得门静脉压(Ppv，mmHg)的数据。 1．2．3免疫组织化学染色大鼠肝组织予10％中性福尔马林液固定，24h后逐级酒精脱水，二甲苯透明， 56 再用o rnin；加 Anti—RabbitDetection Two—StepTM Reagent(HRP)，37 胶封片。以PBS替代一抗作为空白对照染色。 图象定量分析：免疫组化染色切片每组各取3张，随机选择5个不同视野，在20×lo放大倍数下，测定 标准测量窗口中肝窦壁阳性区域的面积比。 异。 2．结果 2 1 f-j静脉直径与压力的变化 (P005)。 的2 28％。P0．05)。见表1。 裹1 DMN诱导大鼠肝硬化时门静睐直径和压力的动态变化(x士8) 05 注与屙期正常组比较，*pO 2．2肝窦壁Car一1的动态变化 央静脉附近肝窦壁可见较强阳性染色。随着造模的进行，肝寞壁阳性染色逐渐增强，至造模4w时达到高峰。 d0．05。 Car一1各动态观察时间点的均数作相关分析，r一0．923，P ·328· 衰2 DMN诱导夫鼠肝硬化时肝窦壁Car 1襄遮的变化(x士s 注：与正常组比较，*P0，05