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维普资讯 36D TianjinMedJ，Jun2005，Vol33No6 实验研究 c-myc靶向siRNA真核表达载体的构建和鉴定 翟荣林 王国斌 夏泽峰 摘要 目的：设计构建重组体为转染肿瘤细胞，观察癌基因的沉默效果，为探索肿瘤基因治疗的新途径打好基础。 方法：以c—myc为靶基因，以pEGFP-C1／U6质粒为载体，设计构建重组体，根据e-mye癌基因eDNA序列，设计有小发 夹结构的3条寡核苷酸序列，克隆到空载体pEGFP—C1／U6中，转化DH5a菌株，提取质粒，进行酶切鉴定和测序分析。 结果：经酶切鉴定筛出的重组体测序结果与目的序列相同，重组载体构建成功。结论：利用RNAi技术可成功构建小 干扰RNA重组体。 关键词 基因，myc RNA，小分子干扰 遗传载体 重组，遗传