C6%2f36浓核病毒结构研究.pdfVIP

电子显微学报J．Chin．Elecu．Microsc．Soc 25(增刊)：213—2142006年 213 C6／36浓核病毒的结构研究 程凌鹏1’2，陈森雄1，李志红1，周正洪3，张景强” (1．中山大学有害生物防治及资；馨利用国家重点实验室，广东广州510275；2．华南理工大学生物科学 of 与工程学院，广东广州510640；3．Department Pathology＆LaboratoryMedicine，University ofTexasMedicalSchoolatHouston，Houston，TX77030，USA) 2002年我们从白纹伊蚊C6／36培养细胞中发现进行精修。以此找回被等价线算法所抛弃的许多病 和分离得到一株新的浓核病毒，命名为白纹伊蚊 毒颗粒，这样我们将5000多个病毒颗粒图像进行叠 C6／36cell 加，最终获得0．9nm分辨率的三维结构。获得的最 C6／36培养细胞浓核病毒(山如albop缸gs densovirus，简称C6／36DNV)。病毒的DNA长度为终结构显示C6／36DNV在五次轴顶有一突起，是由 4090 五个细长的管状结构并在一起，而形成的束结构，中 bp。衣壳由结构蛋白VPl和VlY2组成。电镜 细胞病理学的研究表明，C6／36DNV能抑制登革病 间有一个小的通道。这是细小病毒的一个显著特 毒在感染细胞中的复制，而登革病毒能促进C6／36征。在三重轴的顶点有一类三角形的凹陷，被三个 DNV的致病性。应用C6／36DNV感染白纹伊蚊1龄突起包围中间有一个类三角形的孔，其三边长的外 幼虫，死亡率可达97．46。用萤光定量PCR方法测侧各有一圆孔。而在二次轴顶点及附近有一类似 定受感染伊蚊体内病毒数量的变化，证明C6／36 “裂缝”。比较完整和空的病毒的结构，显示DNA与 DNV还能潜伏在幸存下来的成蚊体内并且能稳定 衣壳共有60个结合位点，分别对应60个占据非对 地遗传给下一代。通过实验，又证明在蚊子体内登 称单元的衣壳蛋白。这些结合位点恰好处于二次轴 DNV 革病毒能促进C6／36DNV的大量增殖而C6／36 通道下方，提示这些通道是DNA从衣壳中流出的通 反过来能抑制登革病毒的增殖。从而表明C6／36道。 DNV是一种极有前景的灭蚊和防治登革病毒的生 2生物信息学的比较 物药物。 为了探索病毒三维结构与其基因序列之间的联 1高分辨三维结构的测定 系，我们应用计算机生物结构信息处理技术把己获 C6／36 DNV衣壳由结构蛋白VPI和VP2组成。得的C3／36DNV的数据与其他的细小病毒进行比 VP2其实是VPl的一部份，仅比VPI的N端少了一较。比较的对象主要是：人类B19病毒(B19)，犬细 段。C6／36DNV结构简单，适合于作为研究病毒的 结构与功能的一种模式生物。我们应用冷冻电镜单 经获得三维晶体结构研究的细小病毒，由于分辨率 颗粒技术，蛋白质结构预测以及克隆表达和重组等 不相同，我们分两个层次进行比较：一是三维结构的 技术对C6／36DNV的高分辨三维结构和重组机理进 分辨率为1．2nm下进行比较。在这个层次与B19， 行了研究。 CPV和GmDNV进行比较，它们的衣壳蛋白结构从 DNVProleinData 首先应用冷冻电镜单颗粒技术测定C6／36 Bank网络数据库下载，其编号分别为 的高分辨三维结构。计算机三维结构是通过基于二 十面体等价线方法的IMPS软件包获得。