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MicroRNA一17—92对人套细胞淋巴瘤细胞
放射敏感性影响的研究
江萍王俊杰
北医二院肿瘤治疗中心
7
目的探讨microRNA一1 1792
92对人套细胞淋巴瘤细胞放射敏感性的影响，观察mieroRNA
对人套细胞淋巴瘤细胞照射后增殖，周期及凋亡的影响。
方祛1细胞转染：采用人套细胞淋巴瘤细胞系Z138c，将已构建好的质粒TMP2miR一17-92和
空载体TMP2质粒(中科院动物所饶恩r博士惠赠)应用pRevTetOn转染体系转染细胞，获得稳
17
定高表达miR 92的z138cTMP2mir 38c
17·92细胞系和Z1TMP2细胞系。
2悬浮』立养细胞培养
3细胞照射条件：医用直线加速器6MV
x线，剂量，#400cGy／min．源皮距10t?cm照射
38c
4台盼蓝染色活细胞计数：z138cmiR—17—92和zl
TMP2两组细胞不同照射剂帚后培养不同
时l刈进行胎盘蓝染色汁数活细胞，并绘制细胞牛长曲线。
5’H 38cmiR17 38C
TdR掺人方法检测ZI 92和zl TMP两组细胞随照射剂量增加时增殖情况。
6 Hochest33324染色
7流式细胞仪检测两组细胞周期时相分布和PI单染阳性细胞比率。
8统计学分析：采用SPSSl6
0软件。定量资料中的描述统计麻崩mean±SD表示，对实验结果
进行配对f榆骑，K0．05为显著性差异。
结果：
l Z138cTMP2miR17 38c
92细胞及ZITMP2细胞形态未照射细胞形态(图1、图2)
Z138c—miR7 400x
图1 1 92 图2 ZI38c—TMP2400×
2．未照射细胞培养4天的形态f罔3和罔4)
■鬻
Z1 x
图3 38c—miR1792 400 幽4 Z138cTMP2400×
s95
3照射4Gy后培养4天的细胞形态(固5一围6
一愿
围7嘶不同时间细胞生长 圈8 2Gy不l刊时闻细胞生长
胎盼兰染色活细胞计数(图78图)
Z138c 400。
图11 miR一17—92
__“) …★I
剧104Gy照射后不同时间细胞生托 图12 Z138cTMP2400×
2 1HTdR掺人方括测细胞增殖
表1不同照射剂量培养96h所测3HTdR掺^数值(x+SD
剂量 0 0．5 1 2 3 4 6
5 59 +3 49 092±005
TMP2组18．96±14．04±11i8i
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