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猪繁殖与呼吸综合征病毒N蛋白特异性卵黄抗体的制备与鉴定.pdf
( ) 36 (3) : 269～274 , 20 10
浙江大学学报 农业与生命科学版
Journal of Zhej iang University (A gric Life Sci)
文章编号 (20 10) DOI :10 . 3785/ j . i ssn .. 20 10 . 03 . 005
猪繁殖与呼吸综合征病毒 N 蛋白特异性卵黄抗体的制备与鉴定
1 2 2 1 2
万晓媛 , 扈鸿霞 , 陈 宁 , 邹晓庭 , 李肖梁
( 1. 浙江大学 动物科学学院 动物分子营养学教育部重点实验室 ,浙江 杭州 3 10029 ;
2 . 浙江大学 动物科学学院 浙江省动物预防医学重点实验室 ,浙江 杭州 3 10029)
( )
摘 要 : 将猪繁殖与呼吸综合征病毒 porcine rep roductive and respiratory syndrome viru s , PRR SV 核
( )
衣壳蛋白 nucleocap sid p rot ein ,N P 的基因片段克隆至载体 p E T30a ,转化重组质粒至 Esche richi a col i
( ) (
BL 2 1 D E3 表达融合蛋白6 ×Hi sN ,并以其为抗原免疫蛋鸡 ,制备特异性抗 PRR SVN 卵黄抗体 egg
yolk immunoglobulin ,Ig Y) . 结果显示 : 6 ×Hi sN 在 BL 2 1 中的表达量为 602 mg L - 1 ;将纯化浓缩的
6 ×Hi sN 与弗氏佐剂乳化 ,连续 3 次免疫海兰蛋鸡后 ,经 EL ISA 检测 ,首免后第 36 天抗 6 ×Hi sN Ig Y
( )
抗体为阳性 P/ N = 244 ; 第 83 天的 P/ N 值达到最高 , 为 563 ,抗体经 1 ∶640 稀释后 , P/ N 值为
229 ;经 SD SPA GE 和 West ern blot 分析 ,提取的卵黄抗体的纯度高且具有 良好的免疫反应性. 研究表
明 ,抗 PRR SVN 蛋白的 Ig Y 制备具有简便 、成本低廉等特点 ,可用于 PRR SV 检测试剂盒的开发.
关 键 词 : 猪呼吸与繁殖综合征病毒 ; 核衣壳蛋白; 卵黄抗体 ; EL ISA
中图分类号 : S 8524 + 3 ; Q 785 文献标志码 : A
WAN Xiaoyuan1 , HU Hongxia2 , C H EN Ning2 , ZOU Xiaoting1 , L I Xiaolia
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