环介导等温扩增技术检测痰标本中结核分枝杆菌的研究.pdfVIP

中国国境卫生检疫杂志 年 月第 卷第 期 20082 31 1 · · 7 实验研究与疾病监测 〔 〕 环介导等温扩增技术检测痰标本中 结核分枝杆菌的研究 1 2 1 1 1 3 易海华 丁永健 钱志娟 房 超 吴萍兰 房 婷 徐州出入境检验检疫局技术中心 徐州 ;江苏出入境检验检疫局 南京 ; (1. , 2210022. , 210001 中国矿业大学生物工程系 徐州 , ) 3. 221006 摘要 目的 寻找 种快速的 且敏感度高 特异性强的结核分枝杆菌的检测方法 方法 环介导等温扩增 〔 〕 1 , , 。〔 〕 基因检测 是一种便捷 灵敏度高而又特异性强的核酸基因扩增检测技 ( ) 、 Loop-mediatedisothermalamplificationLAMP 术 本课题组根据结核分枝杆菌 特征性序列设计 对特征性引物对痰液中和培养基中的结核分枝杆菌进行检 。 gyrB 3 测 其中 对环状引物结合于特征性序列中环状结构部分 可极大地加快 反应速度 且不干扰内引物在 。 1 , LAMP , LAMP 反应中作用 结果 实验结果表明 使用环状引物的 反应可在 内完成 总共分析时间不超过 。〔 〕 : , 。 LAMP 0.5h 1hLAMP 检测技术的灵敏度比经典 技术高 倍左右, 检测技术具有与实时 ( )技术相同的特异 PCR 100 LAMP PCRReal-timePCR 度 另外 由于 检测技术是在恒温的情况下进行 不需要特别昂贵的仪器设备 检测方法简单 结果判定直接 。 , LAMP , , , 。 结论 该方法的特点和优势可以使之在基层实验室及现场监测方面广泛使用 在快速检测方面具有一定的开发潜 〔 〕 , 力。 关键词 结核分枝杆菌 环介导等温扩增 环状引物 链置换 ; ; ;