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勤 锨 材 料 2008年增刊(39)卷
基于溶胶一凝胶材料的乙酰胆碱酯酶生物传感器的研究。
王朝瑾,袁金凤,李彦磊
(上海海洋大学食品学院,上海200090)
摘要: 采用溶胶一凝胶技术将乙酰胆碱酯酶固定在 汞电极作参比电极181—2型恒温磁力搅拌器(上海司乐
混合纤维薄膜上,再将酶膜固定在玻碳电极上,制备了
可用于有机磷农药检测的电流型乙酰胆碱酯酶生物传
感器。对影响酶固定化及影响酶对底物响应的主要因 东核级树脂有限公司)。
素分别进行了考察,获得最佳酶的固定化和反应条件。
并利用该传感器对甲胺磷农药进行检测,检测下限可
pH
达6.31×10-10mol/L。 氯化乙酰硫代胆碱(Sigma公司);正硅酸四乙酯
关键词:溶胶一凝胶技术;生物传感器;酶膜 (TEOS,中国医药集团上海化学试剂公司);聚乙二醇
中图分类号:TP212.3 文献标识码:A
文章编号:1001-9731(2008)增刊-0472—03
二钠、磷酸二氢钾均为分析纯;实验用水为去离子水。
1 引 言 2.2酶电极的制备
在10ml的试管里依次加入0.75mlTEOS、
生物传感器是利用生物活性组分特有的识别能力,
与可感知这一识别过程的信号转换器结合在一起组成
溶液完全澄清后加入50弘lPEG400,涡流混匀。4℃水
的一种小型分析器件n]。具有选择性好、灵敏度高、分
解过夜,即为溶胶一凝胶溶液。依次取2.5肛l溶胶一凝胶
析速度快、操作简便、成本低等特点适合于在线或活体
7.0
溶液、5p1(0.2U/p1)AChE及4p10.1mol/LpH
检测。尽管目前真正商品化意义上的生物传感器还为
数不多,但作为一种多学科交叉的高科学技术,生物传 的磷酸盐缓冲液于lml的塑料离心管中,充分混合均
感器将发展成为一种强有力的生命科学分析工具。 匀。然后用微量进样器将混合酶溶液涂抹到活化好的
其中,生物活性组分的固定化技术是生物传感器
研制开发的重要基础。固定化技术是提高生物传感器 出,用橡胶圈将其固定到玻碳电极上,即得酶电极。
性能的关键因素,它决定该生物传感器的稳定性、可靠 测定前先将酶电极在含1%甘氨酸的0.1mol/L
7.0的磷酸盐缓冲液中采用循环伏安法反复扫描,
性及其使用寿命。材料科学的发展将会为生物分子的 pH
固定化技术带来新的发展空间。目前,生物分子的固 使酶活化。不用时,可将酶片于干燥的2ml塑料离心
定化技术主要包括:物理吸附法、共价键合法、交联法 管中4℃保存。
及包埋法。上述几种方法均存在一些弊端,如物理吸 2.3测定方法
附容易发生生物分子的泄漏,共价键合或交联法易导 取4.0ml0.1mol/L
pH7.0的磷酸盐溶液作为支
致生物活性分子部分失活等。 持电解质,放人恒温电解池中,水浴温度控制在25℃,
溶胶一凝胶材料所具有的诸多
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