第三章基因工程常用受体细胞.pptVIP

第三章：基因药物体外表达的受体细胞 第一节、宿主细胞选择原则 1、容易获得较高浓度的细胞； 2、安全，不致病； 3、遗传背景清楚，容易进行DNA重组操作及遗传改造； 4、产物的产量高（表达水平和稳定性） 、生物活性高 5、产物容易提取纯化。 6、容易进行代谢调控； 7、易培养（生长速度、营养需求、氧耗量等），培养成本低 第二节、宿主细胞分类及特点 分类：原核细胞（大肠杆菌、枯草芽胞杆菌、链霉菌等） 真核细胞（酵母细胞、哺乳动物细胞、昆虫细胞） 一、原核表达系统的特点 （一）优点： 1、 结构简单，基因组成及功能相对清楚，易于遗传操作及转化 2、生理代谢途径及表达调控机制相对清楚，便于表达调控 3、生长迅速，要求条件低（大肠杆菌倍增时间为17分钟），易于大规模培养。 （二）缺点 1、不能识别剪切内含子，不能表达基因组DNA，只能表达cDNA； 2、缺乏真核生物的蛋白质加工修饰系统，不能进行蛋白酶解、糖基化、磷酸化、乙酰化、硫酸化、酰胺化等修饰作用； 蛋白酶解作用：从蛋白前体中切去一段氨基酸序列，从而获得功能性分子 糖基化意义： 赋予蛋白独特的结合性并增强稳定性 3、不具备真核生物的蛋白质复性系统（如蛋白二硫键异构酶），不能进行真核蛋白的正确折叠； 二、酵母（yeast）表达体系特点 酵母菌是最简单的真核单细胞生物； 是外源真核基因最理想的表达体系。 （