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JSCCL XUBIN ELISA及相关免疫分析技术 江苏省临床检验中心 许斌 概述 ELISA是一种敏感性高、特异性强、重复性好的实验诊断方法，由于其试剂稳定、易保存、操作简便、结果判断较客观等因素，以及既适宜于大规模筛查试验又可以用于少量标本的检测，既可以做定性试验也可以做半定量分析等优点，已广泛应用于微生物学、寄生虫学、肿瘤学和细胞因子等领域。ELISA的影响因素较多，加强质量管理才能充分发挥其方法学的优点。 ELISA 1971年Engvall等人把免疫组化的EIA技术应用于临床检验发展为ELISA （Enzyme Linked ImmunoSorbent Assay）技术，酶联免疫吸附剂试验。 特点 ：在聚苯乙烯固相载体表面组装免疫活性物质形成“免疫吸附剂” 酶标记免疫活性物质，化学显色剂进行信号放大； 有二步温育反应二次洗涤过程； 灵敏度、特异性相对较高。 ELISA原理 双抗体（原）夹心法 检测抗原（体）的常见方法，应用针对抗原两个不同决定族的两种单抗分别作为固相载体和酶标抗体检测溶液中的抗原（适用于二价以上抗原,不能测小分子半抗原）。 间接法 检测抗体的方法，利用酶标记的抗抗体（一般为抗人IgG）检测已与固相抗原结合的抗体，因有干扰须稀释标本。  竞争法 检测抗原或小分子半抗原、抗体，以测抗原为例，使待测抗原和酶标抗原