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枇杷属植物叶片成分和抗氧化活性研究 洪燕萍L2，林顺权r，魏孝义3 学院华南植物园510642) 本文以香花枇杷作为枇杷属近20个野生种的代表，以栽培枇杷为参照，使 用多种分离和检测手段，探查枇杷属植物叶片中含有的物质，以期作为今后枇杷 属植物药物利用的研究基础。同时采用DPPH和FRAP两种方法检测枇杷属植物 叶片提取液的抗氧化活性，并测定提取液中所含的黄酮、多酚等抗氧化物质的含 量。主要结果如下： 1．低极性成分的GC．MS检测香花枇杷与栽培枇杷提取液浸膏的石油 醚萃取部，经GC—MS检测，数据检索NIST库，基本判定了108种物质，香花枇 杷两个部分的石油醚萃取部共判定了98个成分，栽培枇杷判定了75个成分。所 检测鉴别出的物质，主要有醇、酯、酸、酮、烯烃、烷烃等，其中萜类有34种。 12个种类的叶片干粉乙醚提取液，也经过GC．MS检测，所有样品经检测及谱库 检索后确定了67种物质，烷烃占了22种，酯类有12种，其他还有醇、烯烃、 酸等。各种物质的含量也进行比较，并根据色谱图数据进行聚类分析。 2．枇杷属植物三萜酸类成分的HPLC分析及指纹图谱的初步建立实验 ODS2色谱柱，流动相为乙腈一甲醇一水一乙酸胺(60：14：26： 中使用hypersil 枇杷属15个种类植物的叶片干粉提取液的熊果酸含量，并补充测定了齐墩果酸 齐墩果酸的含量。同时初步建立了这15个种类枇杷属植物三萜酸类成指纹图谱， 并进行了聚类分析。枇杷属各种类间熊果酸含量差异很大，范围为14．o一3．0mg／g 干重，含量最高的为南亚枇杷。 3．枇杷属植物的黄酮、总酚含量及与抗氧化活性的关系 枇杷叶烘干温 度会影响黄酮多酚的含量，当温度过高时(达到80℃时)，会导致黄酮、多酚含 量下降，抗氧化能力下降。叶片变黄褐色，与40℃及60℃时烘干的状态有明显 不同。以水及不同浓度乙醇为溶剂分别提取香花枇杷及广西枇杷，所得提取液不 论是黄酮、多酚含量，还是抗氧化能力，都以50％乙醇提取效果较好。 所测定的12个种类的不同枇杷属植物干粉中，倒卵叶枇杷、台湾枇杷、栎 叶枇杷、台湾枇杷恒春变型、椭圆枇杷、南亚枇杷黄酮及总酚含量高，且抗氧化 能力强。大渡河枇杷、香花枇杷、大花枇杷、广西枇杷、普通枇杷野生树、早钟 六号的黄酮、多酚含量较低，且抗氧化能力较弱。黄酮与多酚的含量与自由基清 除能力及总还原能力均呈极显著的正相关。 4．枇杷属植物的多糖含量 样品多糖含量分为以下6组，最多的为栎 叶枇杷(80．79，相当于葡萄糖mgIg干粉，下同)，第二为香花枇杷(72．685)，第 南亚枇杷(55．9—54．3)；最少的一组为椭圆枇杷、台湾枇杷、普通枇杷野生树、 台湾枇杷恒春变型、栽培枇杷早钟六号、倒卵叶枇杷、广西枇杷(45．4．41．8)。 s．香花枇杷、栽培枇杷提取物抗氧化活性成分检验 实验结果表明栽培 枇杷清除自由基能力低于香花枇杷，浓缩液部分比沉淀部分清除自由基能力强。 沉淀部分以萃取剩余部抗氧化能力最强。浓缩液部分乙酸乙酯、正丁醇及水相的 自由基清除率高。可以看出高极性部分抗氧化能力强于低极性部分，这与性质实 验的结果比对，可以发现极性大的部分中存在黄酮、多酚等抗氧化活性成分，而 低极性部分中主要有甾醇及皂苷苷元，基本不具有抗氧化活性。 6．香花枇杷成分的分离纯化与化合物的结构鉴定 香花枇杷浓缩液乙 酸乙酯部，经柱层析分离纯化得到单体化合物a，b，C，A，A．B，B，C，D，Fb，G，H，I，J。 结构鉴定结果表明A与C为同一化合物，H与G为同一化合物，因此共分离纯化 委陵菜酸(2a，3p，19Ⅱ一三羟基乌苏烷一12一烯一28一酸，B)。c为胡萝卜苷，D 与H为表儿茶素，G为熊果苷(对羟基苯酚葡萄糖苷)，Fb为3-0一鼠李糖斛皮素， I为金鸡纳素la，J为金鸡纳素|b。其中熊果苷、胡萝卜苷及3一羰基-2a，19a一 二羟基乌苏酸(除离体培养枇杷中分离到)为首次从枇杷属植物中分离得到。 7．单体抗氧化活性及香花枇杷、栽培枇杷抗氧化萃取部的抗氧化活性与黄 酮、多酚、皂甙的含量 用DPPH自由基清除实验及FRAP两种方法测定五个化合 物的抗氧化能力，从大N4,依次为：金鸡纳素Ib、金鸡纳素Ia、表儿茶素、斛皮 素鼠李糖菅、熊果苷。针对香花枇杷和栽培枇杷的抗氧化活性萃取部，实验中黄 酮、多酚及皂苷含量均与FRAP法测定的氧化还原能力正相关，与DPPH的EC50 负相关即与DPPH自由基清除能力正相关。皂苷含量与黄酮多酚含量也呈正相关。 通常黄酮、