Vc二步发酵论文：玉米浆质量标志物混菌传代培养营养组学过程分析技术.docVIP

Vc二步发酵论文：玉米浆质量标志物混菌传代培养营养组学过程分析技术 【提示】本文仅提供摘要、关键词、篇名、目录等题录内容。为中国学术资源库知识代理，不涉版权。作者如有疑义，请联系版权单位或学校。 【摘要】生物发酵是一个细胞与营养环境不断相互作用的过程，它们之间的作用使得营养物质传递到胞内，进而产生一系列生理生产特性。因此营养环境对生物发酵的产率和稳定性具有重要影响。本研究运用过程分析技术（PAT）策略，试图对维生素C二步发酵进行营养组学研究。基于GC-TOFMS和ICP-AES建立了玉米浆中化学成分和元素的检测，分离鉴定了56个化合物和10种元素，运用正交偏最小二乘判别分析法（OPLS-DA）筛选得到17个潜在质量标志物。通过外加发酵实验，确定了包括丙氨酸、脯氨酸、缬氨酸、甘氨酸、苏氨酸、异亮氨酸、酪氨酸、天冬氨酸和丝氨酸在内的9个氨基酸能协同促进2-KLG的积累。采用主成分分析（PCA）和偏最小二乘法（PLS）分别对工业生产中不同批次的玉米浆进行模式识别。PCA分析显示样本可以分为五类，其中批次3单独聚为一类，主要的差异标志物有乳酸、磷酸、柠檬酸、甘油、脯氨酸、葡萄糖、半乳糖和果糖。运用PLS提取了与2-KLG产率密切相关的X变量的差异，获得4个主成分，构建了玉米浆的质量预测模型，能有效预测73.2%的Y变量，预测相对标准偏差为6.7%。通过模型发现玉米浆批次3有较大偏离。基于本实验室的酮古龙酸杆菌（Ketogulonigenium vulgare）和巨大芽孢杆菌（Bacillus megaterium），通过混菌传代培养使得2-KLG的产率得到提高。为了阐释混菌传代的作用机制，对种子培养基和发酵培养基中的不同传代时间的K.vulgare、B. megaterium和混菌的发酵过程进行了营养组学研究。研究发现在种子培养基中随着传代时间的延长，K. vulgare降解蛋白的能力增强，B. megaterium能够提供的赤藓糖和赤藓糖醇促进K. vulgare的生长和产酸，并且抗逆性能力提高，两菌相互作用得到强化。在发酵培养基中随着传代时间的延长，K.vulgare的生长代谢更为旺盛且逐渐趋于稳定，进化后的B. megaterium能提供的营养物质给K. vulgare，150代混菌相互作用得到强化，糖酸转化率达到最高。这些研究为维生素C工业生产原料的可控性和混菌传代培养促进2-KLG积累的作用机制提供了信息，为实现稳定、高产的工业生产提供了理论指导。 【关键词】Vc二步发酵；玉米浆；质量标志物；混菌传代培养；营养组学；过程分析技术； 【篇名】维生素C二步发酵营养组学的研究 【目录】维生素C二步发酵营养组学的研究 摘要 3-4 ABSTRACT 4-5 前言 9-10 第一章 文献综述 10-25 1.1 概述 10-11 1.2 微生物营养环境的研究 11-16 1.2.1 营养环境概述 11-12 1.2.2 碳源 12 1.2.3 氮源 12-13 1.2.4 无机盐 13-15 1.2.5 生长因子 15 1.2.6 菌群相互作用的生态环境 15-16 1.3 营养组学概述 16-17 1.3.1 生物活性成分的筛选 16 1.3.2 药理药效成分的筛选 16-17 1.3.3 营养组学在微生物营养环境研究中的引入 17 1.4 过程分析技术 17-23 1.4.1 过程分析技术的简介 17-19 1.4.2 现代过程分析仪器的应用 19-21 1.4.3 化学计量学的应用 21-22 1.4.4 过程分析技术在微生物营养组学研究中的应用 22-23 1.5 本课题的研究意义和主要研究内容 23-25 1.5.1 研究意义 23-24 1.5.2 研究内容 24-25 第二章 材料与方法 25-34 2.1 玉米浆 25 2.2 实验菌种 25-26 2.3 实验试剂 26-27 2.4 实验仪器 27 2.5 培养基 27-28 2.6 培养方法 28-29 2.7 实验设计与取样策略 29-31 2.7.1 不同厂家玉米浆发酵的比较 29 2.7.2 不同批次玉米浆工业发酵的比较 29 2.7.3 不同传代时间的生产菌株在不同培养基中营养组学的研究 29-30 2.7.4 外加质量标志物的发酵实验 30-31 2.8 分析方法 31-32 2.8.1 糖酸的测定 31 2.8.2 玉米浆的测定 31-32 2.8.3 培养基及发酵液的测定 32 2.9 数据处理与软件 32-34 第三章 维生素 C 发酵中玉米浆潜在质量标志物的研究 34-43 3.1 引言 34 3.2 不同厂家玉米浆发酵产量的比较 34-35 3.3 玉米浆的成分鉴定及差异 35-37 3.4 标志物的筛选及功能分析 37-40 3.5 添加质量