粘质沙雷氏菌发酵灵菌红素条件研究.pdfVIP

发酵工程学科的进展 ——第四次垒国发酵工程学术讨论套论支集 粘质沙雷氏菌发酵灵菌红素条件的研究 郝名慧，张梁，石贵阳。 (江南大学生物工程学院，无锝，扛苏214036) 摘要：通过对从土壤中筛选得到的粘质沙雷氏苗摇瓶条件的研究，确定最优培养基组成 27．5 为：蔗糖309／L、牛内膏18g／L和CaClg／L，摇瓶发酵工艺为起始发酵pH为8．0．裴藏 量为50mL／250mL，接种量为2％。发酵5d，曼菌红素的产量为634mg／L，生物量为18．54 g／L． 前言 灵菌红素是一类天然的吡咯类红色素，它具有抑制细菌、真菌和疟疾等活性，更重要 的是其具有抗肿瘤作用，因此倍受学者关注“1。目前灵菌红素主要是通过微生物发酵法 人‘33通过摇瓶发酵，灵菌红素的产量为23．5mg／L，随后Alonzo等人‘”通过改变培养基 的C／N比获灵菌红素最高产量达到100 红素产量的影响，使灵菌红索最高产量达到200mg／L，华东理工大学的魏东芝等人“3通 过紫外诱变法筛选高产菌株，再通过发酵分离耦合法获得583mg／L的灵苗红素。本文 以从土壤中筛选得到的，一株具有生产灵菌红素能力的菌株为出发菌株，对其发酵条件 进行优化，最终灵菌红素的产量达到634mg／L。 1材料与方法 1．1材料 1．1．1菌种 本实验室从土壤中筛选得到并保藏。 1．1．2培养基 7．2—7．5。 斜面培养基(g／L)；蛋白胨10、牛肉膏3、Nacl5、琼脂20、pH 7．2—7．5。 种子培养基(g／L)：葡萄糖20、蛋白胨10、牛肉膏3、NaCl5、pH 7．2—7．5。 基础发酵培养基(g／L)：葡萄糖20、蛋白胨10、牛肉膏3、NaCI5、pH 1．2方法 1．2．1色素培养条件 *通讯作者：石贵阳，男，1963年生．博士，教授，E--maillgyshi@sytu．eda．cn 314 第四次全国发酵工程学术讨论会 rpm的摇床培养中 从斜面培养基中挑2环菌体于种子培养基中，于温度25℃，150 16h后，按10％的接种量接种于基础发酵培养基中，于温度25℃，转速150rpm的摇床 h。 中培养72 1．2．2生物量的测定 发酵液于12000rpm的条件下离心10rain，弃去上清后将得到的菌体用燕馏水洗涤 3次，最后将菌体于60℃烘箱烘干至恒重。 1．2．3灵菌红素产量的测定01 2结果与讨论 2．1发酵培养基组成的优化 2．1．1碳源对菌体生长和灵菌红素产量的影响 碳源在微生物的各种营养需求中，需求量最大，不仅提供了细胞代谢产物的碳骨架， 而且还是细胞最重要的能量来源。为此进行了不同碳源对灵菌红素产量影响的研究，分 别加入等量的果糖、木糖、蔗糖、麦芽糖、甘油和半乳糖，替代基础发酵培养基中的葡萄 糖，其结果如表1所示。 衰1碳源对菌体生长和夏菌红素产量的影响 the of Tab．1Effectofcarl)onooⅡrc目OIItheblomassand yieldprodlgtosin 由表1可知，该菌可以利用二糖，己糖，戊糖，三碳糖，以菌体的生物量和色素产量为 指标分析，双糖优于单糖，酮糖优于醛糖，其中以蔗糖最佳，其灵菌红素产量达到121． 2953 mg／L，菌体干为8．1525g／L，由此确定该菌发酵灵菌红索的最佳碳源为蔗糖。 2．1．2氮源对灵菌红素产量的影