产超广谱β内酰胺酶大肠杆菌地脉冲场凝胶电泳分型研究.pdfVIP

74· 产超广谱口内酰胺酶大肠杆菌的脉冲场凝胶电泳分型研究 康梅陈超扬NormanH陈文昭过孝静郑动斌 大肠杆菌是一种医院感染的重要病原苗，随着第三代头 肟和氨曲南的大脑杆菌经仪器报警怀疑为产EsBLs菌株。 孢菌素在临床的广泛应用，越来越多的医院感染大肠杆菌产 再经EsBLs表型确证试验均为阳性菌株。 生了超广谱B内酰胺酶(EsnLs)。由产EaBLs大肠杆菌引起2．口内酰胺类抗生素以外的药物敏感试验 的医院感染时有爆发流行【1J。并很难治疗，因此，掌握产E臼一 20株产EsBIj的大肠杆菌对环丙沙星、庆大霉素、丁胺 BLs的医院感染大肠杆菌的分子流行病学资料，对控制其医 卡那、妥布霉索、复方新诺明的耐药率分别为：85％，80％， 20％。75％，75％。所有产EsBLs的大肠杆菌均对亚胺培南 院感染流行极有意义。本研究对EsBLs表型确证试验检测出 敏感。 的产EsBLs的医院感染大肠杆菌进行耐药表型及PFGE分型 研究。 一、材料与方法 体DNA进行酶切后可产生14．35条DNA片殷，范围约为 1．材料：(1)菌株及培养基收集四川大学华西医院500kb～1100kb左右。 将PFGE电泳带型资料转化成数值资料后，计算各菌株 2000年1月至2000年6月经细菌室DADE全自动鉴定仪鉴 定并由仪器报警怀疑为产EsBLs的大肠杆菌，将其转种普通问的相似性系数(S一)。根据Sza进行单链锁聚类分析，得 琼脂斜面，次日转种牛奶培养基，．20℃保存。(2)病历资料到相似性系数三角矩阵。其中相似性系数最高分别为98． 集病例资料分析是否医院感染。按照卫生部医院感染判定 9％(菌株11和菌株20)，968％(菌株9和菌株11)。毓值 最小的为25％(菌株5和菌株16)。 标准性’筛选出20株怀疑产EsBIJ的医院感染大肠杆菌。(3) 抗生素敏感试验采用美国DADE公司半定量微量肉汤系 三、讨论 统测定细菌对以下抗生素的最低抑菌浓度：丁胺卡那．四环 医院内感染的患者常具有病情重，免疫力低，长期应用多 种抗生素的特点，治疗极为棘手。大肠杆菌是目前造成医院 素，妥布霉素，TMP／SMZ，环丙沙星，庆大霉素．亚胺培南等。 感染的重要病原菌。而产EsBLs的院内感染大肠杆菌的流行 以上抗生素均由DADENC21试剂盒提供。(药敏结果判定 标准参照2000年版N0cLs) 导致选择有效的抗生素更困难。E,sBLs是由原来的TEM-1， TEM-2，和SHV-1型酶发生单点及多点突变产生的，自从 2．方法：(1)EsBLs表型确证试验口】将头孢他啶30,ug、 1983年首次在德国发现以来，在世界各地都有流行报道ⅡJ。 头孢他啶／棒酸3099／10flg、头孢噻肟30,u．g、头孢噻肟／棒酸 其抗生素作用特点是可水解青霉素类，所有头孢菌素类及氨 30眶／10耀(均为美国BBL公司产品)。按标准纸片扩散法接 曲南。但对头霉素及碳青酶烯类敏感，可被棒酸和舒巴坦抑 种于MH琼脂，35℃孵育18h，对头孢他啶和头孢噻肟中任一 制。由于EsBLs多由质粒携带，该质粒可同时带有对氨基糖 药物．在加棒酸后，抑菌圈直径与不加棒酸的抑菌圈相比，增 昔类，喹诺酮类．磺胺类等多种抗生素的耐药基因，导致Es- 大≥5mm时，判定为产F．sBLs。同时以大肠杆菌A删922