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分子标记在核桃资源和育种研究中的应用 121 分子标记在核桃资源和育种研究中的应用 齐建勋郝艳宾‘王克建吴春林王维霞 (北京农林科学院林业果树研究所，北京100093) 摘要：本文概述了近年来分子标记在核桃种质资源的起源、分类、遗传多样性及品种鉴定和分子 遗传作图、分子标记辅助育种等方面的研究进展。 关键词：核桃；分子标记 以DNA多态性为基础的分子标记，是继形态标记、细胞标记、生化标记之后迅速发展 起来的一种新的较为理想的遗传标记形式。与其他遗传标记相比，分子标记具有以下优点： ①直接以DNA的形式表现，不受组织类别、发育时期和环境条件的限制；②数量极多，遍 及整个基因组；③多态性高，自然存在着许多等位变异，不需要专门创造特殊的遗传材料； ④不影响目标性状表达，与不良性状无必然连锁；⑤有许多分子标记表现为共显性，能够鉴 别纯合基因型与杂合基因型，提供完整的遗传信息【8】。分子标记主要有限制性片段长度多态 性(Restricfion FragmentLength AmplifiedPolymorphic FragmentLength DNA，RAPD)、扩增片段长度多态性(Amplified Polymorphisms，AFLP)、简单序列重复(SimpleSequence 标记技术已越来越多得应用于核桃种质资源和遗传育种研究。 1分子标记在核桃种质资源研究中的应用 1．1种质资源的分类、起源与进化 在种质资源分类方面，长期以来主要依据形态指标，而形态指标易受环境等因素影响。 另外，遗传变异不仅表现在外部形态、蛋白质等生化组分等方面，DNA的非编码区也存在变 异。分子标记可以通过大范围的对物种资源的DNA进行比较，来对其进行更为科学的分类。 L．)起源和分布中心之一，种质资源极为丰富，其分布范围 我国是核桃(Juglansregia 广，遗传类型多样。奚生珂19】通过研究调查和过氧化物同工酶分析，提出我国核桃的栽培实 生群可划分为新疆、华北山地、秦巴山地、西藏高地等4个地理生态型。吴燕民等【4】用80个 析，结果表明：新疆核桃为我国栽培核桃的一个地理生态型；华北山地核桃和秦巴山地核桃 遗传距离较近，应属于一个地理生态型的两个不同亚群；西藏高地核桃与其他地理生态型的 核桃类群遗传距离相差较远，在聚类图上被划为另一大类，西藏高地核桃是作为一个地理生 态型还是作为一个独立的种有待进一步研究。 ‘通讯作者Theauthorfor correspondenc；iinhetaoiht@263．net。 122 jfi果研究进展(4) 通过分子标记技术可以获得资源间DNA水平上的多态性资料，通过对这些数据资料进 行统计分析，可以了解各资源DNA之间的同源程度，从而确定它们的亲缘关系和进化地位。 总带数的89．4％，通过计算各种的遗传距离，用UPGMA方法进行聚类分析表明：核桃属内 组间和种间的亲缘关系与经典分类学的结果一致。吴燕民等位】还用RAPD方法分析了麻核桃 的起源与分类地位，分析表明：核桃楸×核桃的天然杂交是麻核桃形成的主要机制，其中核 过遗传距离的聚类分析表明，加洲的核桃品种与法国和伊朗的品种的遗传关系较近，而与中 国、日本的品种遗传关系较远。Potter等【1 树状遗传关系图，文中指出，由于ISSR呈显性遗传，而SSR标记呈共显性遗传，在分析品 种间的遗传关系上可能更有优势。 1．2种质资源的遗传多样性与品种鉴定 分子标记由于多态性高，可以为种质资源研究提供几乎无限的多态性证据，成为检测遗 传多样性和品种鉴定最有效的工具。通过分子标记进行资源鉴别，可以避免在资源保存中经 常发生的重复和混淆。在资源保存中，核心种质资源要求以最低的成本而能最大限度地代表 资源的遗传多样性，由于果树的产量、品质等性状易受环境因素影响，而分子标记可以避免 环境因素的干扰进而可以对资源的遗传多样性进行科学评价。 用其中的7个标记可以鉴定所有品种。Potter等【”】用ISSR(Inter-SimpleSequenc