鸡组织中尼卡巴嗪残留HPLC检测方法地研究.pdfVIP

鸡组织中尼卡巴嗪残留HP．LC 检测方法的研究 周伟伟职 薛伟芳-卜仕金z (1．扬州大学兽医学院江苏扬州225009；2．江苏畜牧兽医职业技术学院 江苏寨州225300) 摘要：建立了尼卡巴嚎标识残留物在酒蛆织中残留的RPI．,C柱测方法。样品用乙脯提取，正己烷§擎诹，碱倍律【化铝固相柱l净化。 me／ks，定量限为0．1n矶go 肉、肝脏和肾脏中添加浓度分别为o．1、02和0．4 数小于9．79％。 关键词：尼卡巴嗪；鸡；残留；HPI．c 基4，6一二基嘧啶(皿P)组成的复合物。由于尼卡巴嗪复合物中的HDP成分在动物体内可迅速经尿排除体 外，而抗球虫活性成分一DNC通过粪便排泄较缓慢。因此国际上和我国均规定尼卡巴嗪在鸡组织中的残留 标识物为DNC，其在鸡的所有组织中的残留限量(MRL)为0．2 mg／kg(200斗g／l【g)嘲。 早期用于尼卡巴嗪残留检测方法，如差向脉冲极谱法、色谱法等缺乏色谱分析技术的敏感性、选择性和 重现性，现很少应用。尽管液相色谱方法早已被广用于动物组织中化学物质残留分析，但色谱技术在尼卡巴 嗪残留分析方面的应用较晚。1989年一种反相液相色谱法被美国FDA确认并批准用于检测家禽组织中尼 卡巴嗪残留，该检测法使得提纯程序大为简化，并已替代差向脉冲极谱法用于肉鸡组织中尼卡巴嗪残留的 检测[4】。近年来国外报道的尼卡巴嗪及其标识残留物液相色谱检测法日益增多14--L习。 尼卡巴嗪也是我国养禽业中广泛应用的抗球虫药物之一，但目前国内鸡组织中尼卡巴嗪残留检测法检 测的残留物是尼卡巴嗪【lⅧ，尚未见有关标识残留物DNC的检测方法研究报道。本研究旨在建立鸡组织中 尼卡巴嗪标示残留物DNC的检测方法，为今后对该药在鸡组织中的残留监控提供技术手段，以确保动物性 食品的食用安全。 1材料与方法 1．1药品、试剂及仪器 (DMF)、乙腈，色谱纯，美国DIMA公司产品；甲醇、正己烷、三氯甲烷均为国药集团化学试剂有限公司产品， HPLC级；超纯水。 · 碱性氧化铝固相萃取小柱(200 m1)，大连依利特分析仪器有限公司产品。 mg，3 高效液相色谱仪：日本Shmadzu公司，配Lc一10 Atvp泵、Spd一10Atvp紫外检测器。 1．2试液的配制 DNC标准工作液的配制：准确称取DNC标准品2．50 mg于25ml棕色容量瓶中，加入适量N，N一二甲基 甲酰胺(DMF)，超声波辅助溶解，冷却后定容至刻度，即为1000 n-g／l的DNC储备液。使用前按要求配成系列 标准浓度。 一71— 流动相的配制：将乙腈和水按50：50(v，V)的比例混匀后过滤，超声波脱气。现配现用。 1．3 HPLC测定条件 测波长为340nm。 紫外检测灵敏度：O．020AUFS。 1A标准曲线的绘制 准确吸取DNC标准储备液适量，用流动相稀释成20、10．0、5．0、2．0、1．0、0．5和O．2 mg／l的系列标准工作 液(对应的组织样品浓度分别为4．0、2．0、1．0、0．4、0．2、0．1和0．04mg慨)。在上述色谱条件下，按浓度从低到 高的顺序分别进样20斗l作HPLC分析。每个质量浓度重复5次。以标准液质量浓度为因变量，各质量浓度 对应的峰面积为自变量，作线性回归，并绘制标准曲线。 1．5组织样品前处理 ’ 将鸡的肌肉(胸肌)、肝脏和肾脏样品剪碎、匀浆。取均质后的供试样品，作为供试试料。准确称取5．09试 料于30 r／min的转速分散提取2min。4