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Gene Express 基因快讯2010年第2期 BioTek SynergyTM H4全功能微孔板检测仪在基因组学 和多重检测中的应用 基因组研究计划包括以全基因组测序为目标的结构 双自动进样器用于进行快速闪光分析和荧光离子通道分 基因组学和以基因功能鉴定为目标的功能基因组学。随 析等实验。除此之外，其主要检测模式还包括：荧光强 着科技的发展，基因组学研究重心已开始从揭示生命的 度检测 （FI ），荧光偏振检测 （FP ），时间分辨荧光检 所有遗传信息转移到在分子整体水平对功能的研究上。 测 （TRF ），高性能发光检测，紫外/可见吸收光检测， 功能基因组的任务是进行基因组功能注释，了解基因的 AlphaScreen / AlphaLISA等。 功能，认识基因与疾病的关系，掌握基因的产物及其在 另外，通过对传统方法进行改进，还可使用BioTek 生命活动中的作用。在使用全局方法进行研究时，如基 公司的Take3超微量多体积检测板进行原位微量BCA法蛋 因表达调控 （如荧光素酶、GFP 、GUS等报告基因系统， 白定量分析。BCA 蛋白定量法相对于其它比色定量法具 核酸蛋白相互作用）、信号转导通路 （如受配体基相互 有操作简单、稳定、灵敏度高等优点。相对于蛋白质的 作用、蛋白质蛋白质相互作用、离子通道研究）等研究 固有的280nm吸收峰检测，BCA检测法提高了蛋白检测灵 时，研究人员往往需要同时检测大量基因的表达水平或 敏度和特异性，消除了核酸的干扰，核酸干扰在对细胞 指标，从而在整体水平上获得相关信息。这就需要检测 裂解物或其他生物样品进行蛋白定量时总是一个难以避 仪器不但要具备功能全、性能佳、通量高、速度快的特 免的干扰。在碱性条件下，蛋白将Cu2+ 还原为Cu+ ，Cu+ 点，还要兼顾使用上的方便和灵活。同样的需求也出现 与BCA试剂形成紫色络合物，其吸光值与蛋白浓度成正 在多重检测应用中，比如在药物筛选和药物研发领域， 比。测定在562nm处的吸收值，并与标准曲线对比，即可 用于多靶点生物标记同时测量的多重检测法就体现出了 计算待测蛋白的浓度。和传统标准BCA方法 （BCA工作 巨大的潜力。 缓冲液和蛋白质样品体积比为20:1）相比，该方法的蛋白 多功能微孔板检测仪 （M u l t i -m o d e m i cr op l a t e 检测灵敏度有明显的提高。相比与Mini-BCA分析方法， readers ）是当今生命科学实验室必不可少的一类仪器。 原位分析方法更加精确。 目前先进的读板技术已经可以在荧光、发光、吸收光的 基础上实现多到令人难以置信的检测方案。但市面上 绝大多数的微孔板检测仪不是基于光栅系统就是基于滤 光片系统。光栅系统的特点是波长选择较为灵活，在进 行某项新的实验之前无需购买滤光片，并且可以实现一 定范围内的光谱扫描。滤光片系统的特点是透光率比较 高，从而可以提高检测的灵敏度，尤其适用于荧光偏振 （FP ），时间分辨荧光共振能量转移 （TR-FRET ）等实 验。总体看来，无论是光栅还是滤光片系统都有自己的 优势，但是当我们选择其中一种时无疑就会牺牲掉另一 TM 图1. Synergy H4全功能微孔板检测仪 方面的性能。美国BioTek仪器公司于20 10年新推出的旗 舰型产品——SynergyTM H4全功能微孔板检测仪 （图1） 一．产品介绍 正是这样