海南黎族高血压人群血管紧张素转换酶基因多态性的研究.pdfVIP

会议交流 全国免疫学与分子生物学技术新进展研讨会 海南黎族高血压人群血管紧张素转换酶基因多态性研究 海南医学院附属医院心血管内科钟江华 云美玲 王红霞黎海文 海南医学院生化教研室周代锋蔡望韦 李宗奇 海南省老人病医院金水晶 张勇 刘裕芬王镇 血管紧张素转换酶(ACE)是调节心血管肾素一血管紧将可检验舢u插入片段存在与否，可进一步检验ACE-1和 张素系统的关键酶之一，它可以使血管紧张素I转化为血 ACE-3引物对的PCR扩增基因分型结果的准确性，即当样 管紧张素Ⅱ(AngⅡ)，AIlgⅡ进一步在体内发挥相应的生理本是插入纯合子(Ⅱ型)或插入缺失杂合子(DI型)时，将出 效应。AcE的浓度及其活性与其基因的表达密切相关，进 现一条335bp的PCR扩增片段，当样本是缺失纯合子(DD 一步研究证实人类ACE基因存在插入或缺失(i璐erdon／型)时，将无PCR扩增片段。 del咖n，I／D)的多态性，这种多态性与ACE水平密切相 KCl，2．Omol／L 关[1]。目前，关于ACE的基因多态性的研究很多，国内外(10mmol／LTri8．HCI。pH8．3，50mmol／L MgCl2，o．01％GeLatin)中含模板DNA 研究结果不一致，这与不同的国家、地区、种族基因的变异 0．2心，引物O．2～ DNA聚合酶(宝 不同有关，存在明显的种族和地区差异[2]．海南有独特的 o．5弘mol／L，dNTP为200pmol／L，1UTaq 96梯度PCR 气候环境、地理条件，黎族是海南特有的少数民族，有特殊 生物大连工程有限公司产品)，置Tgradjent chain 的遗传背景。本文应用聚合酶链反应(pol皿erase I／D 环32次，将扩增产物在z％的琼脂糖凝胶中电泳，经EB染 reaction，PcR)技术对海南黎族高血压患者群的ACE 多态性进行分析，为黎族高血压的预防和治疗提供重要的 色在紫外光灯下观察结果。 分子生物学资料． 3．数据处理：应用SPSSl3．O统计分析软件包进行资 料分析．计算各组基因频率及等位基因频率，组间比较用 对象与方法 卡方检验。性别、年龄、体重、血压比较用t检验．P0．05 为差异有统计学意义． 一、对象及DNA样品 血样标本均采自海南省陵水、昌江黎族自治县的黎族 结 果 人群．祖籍为黎族且三代以上父母双方均为黎族者入选。 共选取257人，其中高血压病组111例，正常对照组1461．一般资料，黎族正常对照组与高血压组比较，在年 名。高血压诊断标准符合1999年WHo修订成人高血压龄、性别、体重上无显著差异I正常对照组收缩压(113．1士 分类标准，并通过病史询问、体格检查及心电图等辅助检 查。取静脉血3ml，用EDTA抗凝，按Lahiri等‘31方法提 取DNA． 之间收缩压、舒张压差异有统计学意义(Po．05)．见附 =、方法 表1． 1．引物设计与合成：参照王谷亮等‘卜妇报道稍有改动 设计引物并委托合成引物。引物序列如下；ACE-1：5，．CTG应。得到三种基因型；DD型(缺失纯合子，只出现233bp GAGAGCCACTCCAATCCT