基因工程练习题一答案.docVIP

基因工程练习一答案 一、填空题 1． 70；按人们的需要而定向地改造和创造具有新的遗传性品种 2． 细菌发酵；真核细胞培养；乳腺生物反应器 3． 1973 4． (1)分子水平上的操作；(2)细胞水平上的表达 5． 克隆基因的类型；受体的选择；载体的选择 6． 1972；P．Berg；Proc．Natl．Acad．Sci．USA；证明体外重组的DNA 分子具有生 物学功能 7． (1)扩增DNA； (2)获得基因产物；(3)研究基因表达调控；(4)改良生物的遗传性 二、选择题(单选或多选) 1．C； 2．C； 3．a； 4．B 5. A 6. A 7. B 8. B 三、简答题 1． 答： 这是因为：(1)1967 年发现了连接酶；(2)大肠杆菌的转化技术是1970 年获得突破；(3)限 制性内切核酸酶的分离始于1970 年；(4)Berg 在1972 年构建了第一个重组的DNA 分子。 2． 答： 将一个生物的DNA 片段插入到一个载体中，并引入到另一生物体中进行繁殖。 3． 答： 基因工程的两个基本特点是分子水平的操作和细胞水平的表达。分子水平的操作包 括DNA 分离、切割和连接(还有其他一些DNA 的修饰等)。由于体外重组DNA 的 最终目的是要改变生物的遗传性，所以分子水平的操作和细胞水平的表达是基因工 程的两个最基本的特点。 4． 答： 至少可说明两点：(1)pSC 102 含有复制起点，是一个独立的复制子；(2)重组DNA 分子中的卡那霉素抗性基因得到了表达。 5． 答： 能够分泌乳汁的转基因动物生产其他来源的基因产品，并通过乳腺分泌出来。 四、问答题 1． 答： pSCl02：用EcoRI 切割R6-5，混合转化大肠杆菌，在卡那霉素抗性平板上选择了 一个克隆，并从该克隆中分离了重组质粒DNA，命名为pSCl02。该质粒是由质粒R 6-5 的EcoRI 酶切片段Ⅲ、V 和Ⅷ在体内连接的，说明可以利用体内连接构 建重组体。 pSCl05：作者分别用EcoRI 切割质粒pSC 101、pSC 102,然后加入DNA 连接酶 进行连接后转化大肠杆菌，在四环素和卡那霉素双抗性的平板上筛选到pSC 105。 说明用质粒作为载体，体外连接可得到有功能的重组体。 pSCl09：pSC 101 与RSF 1010 的共整合，即用EcoRl 分别切割这两个质粒，然 后在体外进行重组。说明两个独立的复制子体外重组后仍具有生物功能。 2． 答： 大分子量的DNA 会含有许多特殊限制性内切核酸酶的限制位点，因此用一种限制 酶处理一完整染色体或整个基因组会产生许多不同的DNA 片段，每一个片段带有 基因组的一个不同的基因或一个不同的小片段。当全部片段与用同种限制酶处理过 的载体分子混合时(图A14.1)，每个片段将插入一个不同的载体分子(比如一个质 粒)，同样地，当用这些质粒转化宿主细胞时，每个宿主细胞将只接收一个质粒DNA 分子而筛选出的含重组质粒的每个菌落实际上会含有某一特异的供体DNA 片段的 多个拷贝。一旦带有待研究的特定基因的克隆被确认了，此重组 DNA 分子可从宿 主细胞中提取出来进行纯化。 基因克隆 ：用限制酶制备DNA 片断；片断同载体分子混合；带有不同片断的重组体；转化细胞具有多拷贝的克隆DNA 五、概念题 1． 遗传工程是遗传学和工程学相结合的一门技术科学。借用工程技术上的设计思想，在 离体条件下，对生物细胞、细胞器、染色体或DNA 分子进行按图施工的遗传操作， 以求定向地改造生物的遗传性。遗传工程的概念有广义和狭义之分。 2．生物技术又称生物工艺学，生物工程学。是根据生物学、化学和工程学的原理进行 工业规模的经营和开发微生物、动植物细胞及其亚细胞组分，进而利用生物体所具 有的功能元件(如基因、蛋白质)等来提供商品或社会服务的一门综合性科学技术。 它包括基因工程、细胞工程、酶工程和发酵工程等。 3．基因工程(geneengineering)~称基因操作(genemanipulation)、重组DNA(recombinant DNA)。基因工程是以分子遗传学理论为基础，以分子生物学和微生物学的现代方 法为手段，将不同来源的基因(DNA 分子)，按预先设计的蓝图，在体外构建杂种 DNA 分子，然后导人活细胞，以改变生物原有的遗传特性，获得新品种，生产新产品， 或是研究基因的结构和功能。 4．细胞工程(cellengineering)应用细胞生物学的原理和方法，结合工程学的技术手段，按照 人们预先的设计，有计划地改变或创造细胞遗传性的技术，以及在体外大量培养和 繁殖细胞，或获得细胞产品，或利用细胞体本身的技术领域。主要内容包括细胞融合、 细胞拆合、染色体转移、基因转移、细胞或组织培养等。由于所用细胞的来源不同， 细胞