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光学分析法及紫外.ppt
Energy source: magnetic radiation ICP, Chemical energy Sample: Molecular sample, atomic sample Optical response: Absorbance, Emission, diffraction, reflection, refraction, polarization,scattering. 电磁辐射 分子的紫外吸收光谱产生机理 原子光谱与分子光谱的比较 单光束型 光电二极管阵列型(DAD) 双光束型 2.未知样品的定性分析(对比法) 4.定量分析 朗伯-比耳定律:A= - lgT=εbc Lambert-beer 定律 Lambert-beer 定律 定量测定条件的选择: 测定波长, 酸度,温度等固定; 参比溶液; 控制吸光度范围:0.2~0.7。(⊿C/C小) 混合组分的测定:加合性原则。 A总=A1+ A2+ A3+ ……=ε1bc1+ε2bc2+ε3bc3+….. 5. 溶液澄清。 分光光度法测量条件的选择 双波长分光光度法的应用实例 无须分离,可用于吸收峰相互重叠的混合组分的同时测定 1.主要组成部件:由光源、分光系统、吸收池、检测系统 ①光源:发射连续光谱 钨灯λ:350nm~1000nm 氘灯λ:150nm~400nm 氘灯的灯泡用石英制成,因玻璃吸收紫外辐射。 ②分光系统 由入射狭缝、准直元件、色散元件、聚焦元件和出射狭缝组成。常用的色散元件有棱镜和光栅。 ③吸收池(比色皿) 可见光区:使用玻璃比色皿 紫外光区:使用石英比色皿 ④检测系统 由检测器、放大系统和显示记录系统组成 棱镜——原理:利用光折射,不同波长,折射率不同。 ——特点:非线性色散,现已用得不多 光栅 —— 原理:利用光干涉来衍射 —— 结构:高度抛光平面,刻出大量平行等距槽,600-1200条/mm —— 光栅(反射)单色器结构 —— 特点:色散能力强,分辨率高,匀排光谱--优于棱镜,较常用 0.5, 1.0, 2.0, 3.0 cm 光电管 检测器--光电转换装置 (1) 硒光电池 300-800nm可见区 易疲劳,灵敏度低,已少用 现用:硅光电池 (2) 光电二极管 结构原理:真空管,光敏阴极(碱金属)与阳极间施加电压 光照射--电子--电压--电流--放大 特点:灵敏度高,不易疲劳, 分两种:紫敏210-625 nm,红敏625-1000 nm (3) 光电倍增管PMT 特点:灵敏度很高,高于光电管〉200倍,适于弱光检测 (4)光电二极管阵列 CCD陈列 光电倍增管原理 2.双光束紫外-可见分光光度计 与单光束分光光度计的区别:从单色器分出的单色光一分为二,一份通过参比溶液,一份通过试样溶液,显示或记录的吸光度值为二者之差。 优点:可以消除光源强度波动所带来的影响。 (四)UV法的应用 有机化合物的定性及定量分析、同分异构体的鉴别、物质结构的测定。 1.化合物纯度的测定:当化合物在紫外光谱区的某一波长范围内无吸收,而其中的杂质有强的吸收时,则可用于测定该化合物中的杂质。 例如乙醇中的微量杂质苯的鉴定,乙醇在近紫外区无吸收,而苯在256nm处有最大吸收,在256nm处测定,即可鉴定微量苯的存在。 如果在某一紫外光谱区内,化合物有强吸收而杂质无吸收,也可以用摩尔吸光系数来检查它的纯度。 例如标准菲的氯仿溶液在296nm处有强吸收,测得ε=1.23×104 L·mol-1·cm-1;对精制的菲样品进行测定,在相同波长处测得比标准菲低10%,说明菲样品的实际含量只有90%。 样品含量 λmax=178nm λmax= 177nm ε=26000 L·mol-1·cm-1 ε=11800 L·mol-1·cm-1 λmax=210nm ε=26000 L·mol-1·cm-1 结论?? 山梨酸标
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