大气颗粒物的毒理研究.pdfVIP

大气颗粒物的毒理研究 张桂林 陈建敏程硕 谈明光 岳伟生 李燕 中国科学院上海应用物理研究所上海201800 摘要用生化技术、放射性125I标记技术和同步辐射相反衬成像等技术研究PM25大气颗粒物和摸拟 颗粒物对鼠肺细胞和组织的损伤，以及颗粒物从肺至血液的渗透。实验发现；PM25大气颗粒物的水可 溶性成分能影响肺细胞生长、变形和DNA的氧化损伤。大气颗粒物污染严重的地区对肺损伤严重。汽 车尾气排放的PM25溶液对小鼠的肺损伤最严重．颗粒物中的元素Fc和zn之间可造成炎症的增强作 用。肺的炎症会促使超细颗粒物从肺渗透至血液和其它器官，所以肺炎患者是大气颗粒物的易感人群。 关键词大气颗粒物PM2s细胞毒理u5I标记同步辐射相反衬成像 1引 言 众所周知大气气溶胶中可吸入颗粒物对人体健康的影响很大，它可引起肺炎、哮喘 和支气管炎等等疾病。对粒径小于2．Sum的细颗粒(PM25)，它可以进入人的肺泡，甚至 血液，从而导致心血管疾病。自上世纪80年代以来，大气颗粒物对人体健康影响受到国 内外学者的广泛关注，研究显示大气颗粒物的长期或短期高浓度暴露会导致心肺疾病的 发病率、死亡率增加lI-3]。实验也发现，往往细颗粒具有富集有毒重元素的现象14J，随着 其粒径的减小，细颗粒物在大气中滞留的时间会加长。另外，细颗粒物的相对表面积比 粗颗粒增大，因此它对人体健康的影响也越大14J。但到目前为止，有不少颗粒物引起健 康疾病的流行病学的统计研究，但对健康损坏的生物学起因和作用机制尚不十分清楚。 ～些研究表明，PMa5的生物学效应主要与颗粒物吸附的有机化合物种类及含量有关91； 另一些研究则表明，无机成分，特别是其中的一些过渡金属起着重要的作用10,7J。目前， 关于颗粒物的肺损伤有多种假说p，】，比较一致的观点认为，颗粒物表面吸附的过渡金 属离子会产生自由基，成为颗粒物导致肺损伤的主要原因[10,llJ。颗粒物中存有很多过渡 元素。它们之间对肺损伤有没有相互的协同和拮抗作用呢?这也是大家关注和希望了解 的问题。再者，颗粒物又是如何从肺进入血液，影响人体的心血管的呢?这些问题现已 进行了一些研究”‘”J，但仅仅是开始。 本文从PM25水溶性成份着手，研究无机元素对肺细胞的生长、死亡和凋亡、DNA 损伤等氧化损伤特性；用具有高分辨率的同步辐射相反衬成像研究PM25对小鼠肺的急性 毒理和颗粒物中过渡元素致毒的相关性；用放射性“5I标记研究超细纳米颗粒从肺至血液 的渗透，以及它与肺炎的关系。 国家基金委重大项目(No资助 —·358—— 2大气PM：。水溶成分的元素分析和它的细胞毒性 2．1材料与方法 2．1．1PM，E的采样和处理 采样用北京地质仪器厂生产的中流量PM25采样器，流量为77．8L／rain，及日本生产 每张膜采样两周(共5张)，采样前后膜干燥称重。将载有颗粒物的滤膜剪成lcm2大小 的小块，浸在20mL纯水中，超声震荡30分钟，反复三次。将提取的颗粒物溶液离心分 离，收集水溶上清液(为方便对比，水溶部分的浓度沿用总体颗粒物浓度)，用纯水调成 浓度为]0001-tg／mi染毒液。结果得出，水溶成分占PM25重量的1．75％。 2．1．2模拟染毒液ZnCl2、Pb(CH3COO)2的制备和元素含量分析 备用。 使用电感耦含等离子体质谱仪(X-7；Thermo 最佳化条件选择，仪器使用标准模式。染毒液经适当稀释后直接进样，稀释分析中使用 18．2 M0的超纯水(MiliQ 元素选用“’In。 2．1．3细胞培养与染毒 中国仓鼠肺成纤维细胞购自中国科学院生命科学院细胞所。用含10％tJx牛血清 染毒液染毒，置37℃、5％C02培养箱中培养12h之后取出做细胞活力、细胞氧化损伤和 细胞凋亡与细胞周期的检测。 2．1，4细胞活力、氧化损伤和凋亡等毒性反应检测 细胞活力的检测采用四唑盐(MTT)比色法f14】，按下列公式计算生长抑制率；生长抑 状态的变化。用测定SOD、MDA水平来衡量细胞的氧化损伤。通过琼脂糖凝胶电泳旧 检测细胞DNA损伤。用碘化丙啶染色，流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期。 2．2结果和讨论 2．2．1 PM2s染毒液元素分析结果 测量结果发现PM2 的含量最高，详见表1。 ， 表t