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2011年-2008届-思考题及习题.doc
《生物分离工程》思考题
概论
试述生化物质提炼过程的特殊性及工艺流程概况
发酵液的预处理和过滤
试述除去发酵液中Ca2+、Mg2+、Fe3+离子的方法和杂蛋白质的方法。
用ζ电位来解释溶液中蛋白质等胶体粒子稳定存在的原因?凝聚和絮凝的机理有何不同?影响混凝效果的因素是哪些?絮凝剂的分类。
怎样衡量各种不同滤饼的特性?试述测定量比阻的方法。
影响过滤速度的因素是什么?可采用哪些方法来提高过滤速度?
细胞破碎
了解微生物细胞破碎的各种方法。
包含体的分离方法有哪些?
什么是蛋白质的复性,蛋白质复性时应注意什么?
沉淀法
蛋白质为什么可以采用盐析法进行沉淀分离?(NH4)2SO4为什么是最常用的盐析沉淀剂?
在cohn经验式logS=β-KsI中,影响常数β、Ks 因素是哪些?
经实验知道,某一蛋白酶符合cohn经验式,并在18℃,pH7.5的条件下测得β=4.9、Ks=0.32,试估算在酶活力为5000μml的蛋白酶溶液中加入60%饱和度的(NH4)2SO4[相当于456g盐/L溶液]进行盐析沉淀时,蛋白质沉淀是否充分?计算收率为多少?[假设沉淀前后溶液体积不变。S单位为μ/ml]。并讨论当原液浓度变化时,沉淀收率的变化情况。
等电点沉淀及有机溶剂沉淀的原理及影响因素是什么?
吸附法
分子间的作用力可分为哪几种?
何谓Langmuir吸附等温线?
了解大网格吸附树脂主要物理性能的测定方法。
总结采用大网格吸附剂时,应怎样考虑吸附条件和洗脱条件?
有一弱碱性物质,已知PK1=7.3,PK2=8.2,分子量1100,易溶于乙醇、丙酮、丁酯等有机溶剂中,难溶于水,中性下较稳定,pH9及pH4都不稳定,今拟选用大网格树脂提取,试讨论应如何选择树脂的孔径,比表面?并设计提取工艺路线[吸附和解吸条件]。说明理由。
林可霉素为一弱碱性抗生素,分子中有一个胺基,其pK=7.6。在pH2.0和pH11的溶液中稳定性较差。林可霉素盐酸盐易溶于水,难溶于极低的有机溶剂,其游离碱在水中溶解度较小, 而易溶于乙醇(δ乙 =12.7); 丁醇(δ丁 =11.4);丙酮(δ丙 =10.0); 2---丁酮(δ2-丁 =9.3)等有机溶剂。今拟采用大网格吸附法提取,并选择Amberlite XAD-2为吸附树脂(δ聚=9),试考虑(1)适宜的吸附pH范围?说明原因。(2)可采用的洗脱条件是什么?说明理由。
某厂青霉素提炼工段采用pH=2时,用醋酸戊酯抽提,然后再用pH=7的缓冲液抽提。如在发酵液中出青霉素外,尚有一有机酸存在,pK=4在醋酸戊酯与水之间的(真正)分配系数为40,试问该杂质有机酸能否出去?已知:青霉素的pK=3,在醋酸戊酯与水之间的(真正)分配系数为20。
有机溶质萃取法
解释化合物PK值和两性物质PI值的含义。酸性基团和碱性基团呈离子型式和游离分子型式存在时,各应满足什么pH条件?两性物质,当pHPI和pHPI时,那种离子浓度最大?
什么是弱电解质的表观分配系数?说明表观分配系数与pH关系式的推导过程。表观分配系数和热力学分配系数在含义上有何不同?
将青霉素从发酵液中萃取到丁酯中,发酵液与丁酯的体积比为1∶1,萃取条件为pH=2.5,T=10℃,发酵液效价为20000μ/ml。萃取达到平衡时,测得废液效价为645.2μ/ml,pK=2.75]
如欲将上述丁酯相中青霉素反萃取到水相缓冲液中,丁酯与缓冲液的体积仍为
1∶1,pH=7.0 ,T=25℃。试通过公式估算反萃取的表观分配系数。
溶剂萃取分离A和B两种抗生素,初始水相中A和B的浓度(g/dm3)相等,A和B的分配系数与其浓度无关,分别为10和0.1。利用混合、澄清式萃取操作,设每级萃取均达到分配平衡,并且萃取前后各相体积保持不变。
⑴若采用一级萃取,萃取水相中90%的A,所需相比(即有机相与水相的体积比) 应是多少?此时有机相中A的纯度(即A占抗生素总质量的百分数)是多少?
⑵若采用多级错流接触萃取,每级萃取用新鲜的有机相,相比均为0.5,计算使A在有机相中的收率达到99%以上所需的最小萃取级数,并计算有机相中A的实际最大收率和平均纯度。
⑶若采用3级逆流接触萃取,计算使A在有机相中的收率与第(2)问相同所需的相比。
什么是单级萃取,多级错流萃取和多级逆流萃取?画出各种萃取方法和流程图(包括混合罐和分离器)。记住理论收率的计算公式。
有一弱酸性物质,当发酵滤液用有机溶剂二级错流萃取时,表观分配系数为27,每级中加入的有机溶剂体积都是发酵滤液的1/3,然后,将两级得到的萃取合并,在相同的温度下,再用缓冲液二级逆流反萃取,表观分配系数为24,最后得到的萃取液体积是发酵液的1/6,求经过这两步骤操作后总的理论收率是多少?
以醋酸丁酯萃取
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