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2011年度申报辽宁省科技奖励自然科学奖公示
项目名称 中草药天然成分生物转化新特异酶及其微生物研究1)发现了种新微生物,刊登在国际微生物协会新菌刊物Int J Syst Env Bact (IJSEB)和国际微生物学刊物上,得到国际认可。即:高温、厌氧的C thermocopriae(IJSB,1988,38,279),高温好氧的Bacillus sp.JF(J Gen Appl Bact, 1990, 36, 415);与韩国合作发现的K granuli(IJSEB, 2007, 57, 2280);E ginsengisoli ( IJSEB, 2008, 58, 1100),S panaciterrae (IJSEB, 2009, 59, 331),H daecheongensis (IJSEB, 2009, 59, 1183),T ginsenosidimutans(A E Microb. 2010, 76, 5827)菌IJSEB, 2011, 61, 524)等;为国际微生物学增添新菌。
又筛选了60余种16SrRNA基因与已知菌差别较大的菌(生物工程学报,2009, 25: 1863),为筛选中草药成分转化酶,提供新菌资源。
2)发现了17种特异中草药分酶,其中13种酶为发明专利。上述新菌和已知菌研究中,发现了11种特异的皂苷酶: 4种人参皂苷糖苷酶(欧洲发明专利EP1354944B1和美国发明专利U2)包括人参皂苷酶I型(Chem Pharm Bull. 2007, 54, 231)、人参皂苷酶II型(Process Biochem. 2009, 4, 772)、人参皂苷酶III型(A E Microb. 2010, 76, 5827)、人参皂苷酶IV型(Chem. Pharm. Bull., 2002, 50, 175),薯蓣皂苷酶(J. Microb. Biotech. 2010, 20, 1011;发明专利 Z8)、白头翁皂苷酶(发明专利 Z6)、柴胡皂苷酶(高等学校化学学报,2010,31,1152;发明专利申请号200810052927.4)、黄芪皂苷酶(发明专利申请号200710012291.6)、绞股蓝皂苷酶(Process Biochem. 2004: 39, 861)、大豆和朱砂根皂苷酶(论文、专著《天然产物生物转化》2009年化学工业出版社p203、p153)等11种;发现6种其他中草药组分酶:芦丁苷酶(发明专利 Z1)、黄芩苷酶(发明专利ZL 200410020649.6)、淫羊霍苷酶(发明专利Z3)、大豆异黄酮苷酶(发明专利 ZX)、丹酚酸酶(发明专利申2882.0)、红景天苷酶(论文Process Biochem. 2005, 40, 3143)等。
3)所发现皂苷酶对皂苷元种类和糖基位置选择性高,对糖基种类选择性低,能水解皂苷的多种糖基和多种糖苷键,不遵守国际酶学上“一种酶只水解一种糖苷键”的普遍规律的新酶,建立了皂苷酶催化新理论Chem Pharm Bull. 2007, 54, 231;Process Biochem. 2009, 4, 772;J. Microb. Biotech. 2010, 20, 1011)。
4)发明了13种中草药成分转化酶的发酵产酶、酶法制备高活性中草药成分、酶反应产物的分离方法等。发现皂苷酶等在普通酶发酵条件下很难生成、极端发酵条件下才产酶,解决了发酵生产酶的核心技术;发明了用无毒有机溶剂、分离酶与产物、酶不固定化重复使用的理论方法;为酶转化天然产物、高效率地制备高活性成分,解决了关键技术问题发明专利13项中授权10项。不仅增添新酶类,拓展了国际酶学新研发领域,为中草药、保健食品和化妆品行业的技术升级、产业升级,开辟了酶法改变选择性地中草药活性成分基团、制备高活性成分的新领域。Purification and characterization of ginsenosidase hydrolyzing malti-glycosides of protopanaxadiol ginsenoside, Ginsenoside Type I. Chem Pharm. Bull., 2007, 55, 231-235 1.623 2010 金凤燮 7 A new ginsenosidase from Aspergillus strain hydrolyzing 20-O-multi-glycoside of PPD ginsenoside.. Process Biochem. 2009, 44, 772-775.
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