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HPLC指纹图谱控制蜂胶质量 马纪伟 闫冬良 南阳医学高等专科学校 摘要：目的：研究蜂胶的HPLC指纹图谱，对蜂胶进行质量控制。方法：迪马公司Diamonsil(钻石)C18色谱柱(46 mm×250 mm，5μm)；流动相：0.4％磷酸水溶液和甲醇，流速为0.4 mL／min，梯度洗脱程序为：0～4 min，Study on HPLC fingerprint and quality control of Propolis MA Ji-Wei YAN Dong-Liang NANYANG Medical College，Nanyang473058，He NanTo study on HPLC fingerprint of Propolis and to control it’s quality. Methods： The analysis were separated by using a Diamonsil C18 column (46 mm×250 mm，5μm)phosphoric acid)as mobilephase with linear gradient elution．The flow rate Was 0.4 mL／min and the column Was set at 30℃．A photod iode array detector Was monitored at the detection wavelengths of 280 rim，320 nm an d UV spectra were recorded from 190nm to 400nm．Conclusion： Th is method has advantages such as simplicity，selectivity an d sensitivity as a routine procedure．It Call be regarded as a method for the quality control of propolis． ‘ [Key words] Propolis；HPLC fingerprint；quality control 蜂胶是蜜蜂用在植物芽孢与树干上采集来的树胶，混入蜂的上颚腺分泌物和蜂蜡等形成的一种具有芳香气味的胶状固体。蜂胶的化学成分复杂，迄今发现已有上百种之多。其主要化学成分为黄酮类、萜烯类、酚酸类等多种生物活性物质。现代药理研究表明，其功效成分主要是黄酮类化合物，研究表明黄酮类化合物具有抗菌、抗病毒、抗肿瘤、抗氧化、消炎镇痛、防腐保鲜等多种功效，能增加机体免疫力，促进组织再生。我国是蜂胶生产大国，近年来蜂胶产业发展迅猛，出现了出口内销两旺的势头。在这样的背景下，由于利益的驱动，一些不法商贩见机制假售假，特别是以树胶冒充蜂胶的情况比较严重，2010年12月份中央媒体了曝光，引起了广大消费者的关注。如何提高蜂胶原料的质量，打击假冒伪劣蜂胶产品，是摆在我们面前严峻而紧迫的任务…。目前，我国的蜂胶质量标准有两个，分别是商业部的蜂胶标准(标准代号：SB／T10096—92)和农业部的无公害食品蜂胶标准(标准代号：NY／T5136—2002 但这两个蜂胶标准均无法鉴别蜂胶与胶，因为标准中规定的胶含量、总黄酮、氧化指标等项目，树胶均能达到。因此，建立真品蜂胶HPLC指纹图谱，用以鉴别蜂胶真伪显得十分必要和迫切。我们从蜂胶的功效成分一黄酮类化合物着手。测定了真品蜂胶和的HPLC指纹图谱，为蜂胶真伪的有效鉴别提供依据。 1 仪器试剂 仪器：LC一10ATVP高效液相色谱仪(日本岛津)，SPD一10Avp紫外检测器，N2000色谱工作站，8953 Dietikon型电子分析天平(瑞士)；水为超纯水，磷酸为分析纯，甲醇为色谱纯。蜂胶来源于陕西老蜂农蜂业有限责任公司，树胶，从市场上购入。 2 方法与结果 2.1色谱条件 迪马公司Diamonsil(钻石)C18色谱柱(46 mm×250 mm，5μm)；流动相：0.4％磷酸水溶液和甲醇，流速为0.4 mL／min，梯度洗脱程序为：0～4 min，30％甲醇；4～6 min，30％甲醇～62％甲醇；6～7min，62％甲醇～80％甲醇；7～8min，80％甲醇～100％甲醇；8～9.5 min，100％甲醇～30％甲醇；柱温：25℃；进样量：10.0μL；。 2.2 溶液的制备 2.2.1蜂胶供试品溶液 将蜂胶在-10℃冷冻数天后用粉碎机粉碎，取蜂胶样品约0.5g，精密称定，置25ml小烧杯中，分别用20ml甲醇超声2次（每次30min），过滤，残渣用甲醇洗涤2次，过滤，合并滤液，置50 ml容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得 。 2.2.2 对照品溶液