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血液中ATP含量随保存温度和保存时间变化的规律性研究 李成岳2 刘敏霞1柴丽娜1王捷熙1王艳1韩颖1余化刚1 任素萍1 1北京输血医学研究所 2中央民族大学信息与计算科学学院 以ATP含量作为血液质量的评判指标，对4-32℃区间不同保存温度条件下血液的质量 变化进行了系统的研究，得出系列经验数据。假设ATP的浓度y=f(d，t，s)是时间d、温度t 和起始浓度s的连续函数，利用数理统计中的线性回归理论对模型加以拟合，我们得到ATP 浓度随保存温度和保存时间变化的一般数学物理方程，根据方程推算在4℃、6℃、8℃、10℃、 12℃、14℃、16℃、18℃、20℃,22℃、24℃、26℃、28℃、30℃和32℃温度下，以CPDA-1 保存的全血分别可以有效保存35、35、29、22、18、18、13、8、7、6、6、5、4、4和3 天。我们首次系统揭示了保存温度变化时血液质量变化的一般性规律，为准确判断变温血质 量、指导临床合理用血提供科学参考。 血液保存；ATP；线性回归；数学模型 北京制冷学会2012学术年会论文集 器公司。 1．2ATP含量检测 原理是通过检测NADH的吸光度在反应前后的变化计算ATP含量。具体操作参见试剂 盒说明。另取lml待测血样，用血细胞计数仪检测Hb含量。按下列公式计算ATP含量： ATP(1a mol／gHb)=(最初OD值-最终OD值)×195／Hb含量(g／d1)。 1．3游离血红蛋白浓度的检测 l％ lml待测血样离心取上清。在比色杯中顺序加入lml1％苯息丁、0．02ml上清和lml H202，空白管和标准管不加上清，分别加入0．02ml蒸馏水和标准血红蛋白溶液。静置20frdn。 加入10％醋酸lOml，静置10min。利用可见光分光光度计检测OD520nm。按下列公式计算： 血浆游离Hb含量(mg％)=测定管OD值／标准管OD值x20。 1．4pH值检测 取4-5ml待测血样，利用pH计直接检测pH值。 1．5试验分组 4℃．32℃温度区间内每隔2℃设为一个温度组，共15组。每组3个或5个样品。分别 置于相应的温度下保存。4—10℃、10．26℃和26．32℃温度区间分别采用温控冰箱(西门子公 司)、层析柜(北京军事医学科学院仪器厂)以及温控培养箱(美国NAPCO公司)控温， 温度误差为±1℃。每隔一定时间(1d、2d、34d，保证每组采集到的时间点数i4，足够用 la 于统计学分析)检测样品的ATP含量和pH值，直至ATP含量降至2．45mol／gHb(4℃保 u 存35天的ATP含量值)以下。每组保存血的ATP含量均值≤2．45 mol／gHb时检测游离 血红蛋白浓度。 1．6数学建模及验证 具体过程见第2部分。 2．实验结果与数学建模 2．1 ATP含量的变化趋势 u 可以保存35天，第35天时ATP含量为2．45mol／gHb，与Hess等人以酶反应法检测的数 u umol／gHb 值近似110I，并且高于Dem报道的可输注最低限1．5mol／gHb垮J，所以我们将2．45 作为闽值。在有效保存期内，pH值和游离血红蛋白含量均在正常范围内。表l列出了，其中 4℃、16C、和28C保存条件下的血液ATP含量的实测值和预测值。 2．2数学模建 为了从获得的大量数据中寻找血液中ATP浓度随时间(d)与温度(t)及堡垒笠：：：云 的起筮丛￡这堕(s)的变化的规律，即寻找ATP的浓度(y)与保存期(d)、保存温度(t) 合足基于数理统计，特别是线性叫归理论的应用。下面分四步走： ①数据处理