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* * 电化学生物传感器 崔亚琨 测试原理 电化学传感器主要由识别待测物的敏感膜和将生物量转化为电信号的电化学转换器两部分组成,根据产生的电信号类别,可将其分为电流型和电位型两大类。电流型传感器主要基于探测生物识别或化学反应中的电活性物质,通过固定工作电极的电位给电活性的电子转移反应提供驱动力,探测电流随时间的变化,该电流直接测量了电子转移反应的速度,反映了生物分子识别的速度,即该电流正比于待测物质的浓度。电位型传感器将生物识别反应转换为电信号,该信号与生物识别反应过程中产生或消耗的活性物质浓度对数成正比,从而与待测物质浓度的对数成正比。电位型离子选择电极的选择性渗透离子导电膜可设计成与待测离子相关的产生电位信号的敏感膜,测试在电流为零的条件下进行。 　电化学生物传感器研发和应用 由各种生物分子 酶、抗体、受体或全细胞 与电化学转换器 电流型或电位型的电极 组合可构成多种类型的电化学生物传感器,其中生物分子识别的专一性决定了该传感器具有高度选择性。酶电极是最早研发的生物传感器,将酶固定在电极表面,探测电流型或电位型催化反应信号,酶的固定化是决定酶电极特性的关键技术。电流型酶电极基于探测生物催化反应中生成或消耗的电活性物质,大量的氧化还原酶、NAD+ 辅酶及脱氢酶可用于多种底物 葡萄糖、乳酸、乙醇、有机磷等 的检测,产生的过氧化氢和NADH在0. 5～0. 8V vs. Ag/ AgCl 工作电压下很容易被检测;另外加入电介体可进一步降低工作电位,以减少样品中其他电活性物质的干扰。电位型酶电极利用离子敏电极、气敏电极、离子敏场效应管 ISFET 或光寻址电位传感器 LAPS [1～3 ] ,通过检测生物催化反应导致的pH变化、氧化还原电位产生或消耗的离子 如NH+4 浓度或气体 O2 ,CO2 浓度来检测底物;产生的电位信号与底物浓度的对数成正比。除了检测底物外,利用酶电极中酶活性受各种有毒物质的抑制作用来检测有毒物质 氰化物、有毒金属、农药等 。 通过固定全细胞可增加传感器的稳定性和易活化特性,生化耗氧量BOD传感器就是一种全细胞生物传感器,它可对BOD进行快速检测,而传统的生化分析检测需要5天时间。免疫电化学生物传感器利用电活性分子或酶标记抗原进行免疫检测,电流型和电位型电极均可用于该类免疫检测。电化学生物传感器科技发展趋势是微型化和集成化,其微型化和集成化技术,将主要依托于微机电系统 MEMS 的微米/ 纳米制造技术和微电子IC制造技术,具有体积小、重量轻、成本低、功耗低、性能稳定等优点,基于MEMS技术我们成功地研制了微型电极 图1 ,通过进行酶固定化可对多种物质进行快速检测 图2 。I2STAT公司生产的便携式血气分析仪,采用一次性集成生物传感器芯片可对血液中血气 CO2 , pO2 , pH , Na + , K+ , Cl - 等 进行检测,取样量为100μL全血,由于价格昂贵,市场仅限于医院生化实验室[6 ] 。 *