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第三章 植物组织培养的理论基础 §1. 细胞分化与细胞全能性 §2. 器官发生 §3. 离体培养下的遗传与变异 §1.细胞全能性 一. 细胞全能性的一般概念 二.细胞分化 三.离体培养中细胞的脱分化、再分化 三.细胞分化 所谓细胞分化,是指导致细胞形成不同结构,引起功能改变或潜在发育方式改变的过程。分化也可以说是相同基因型的细胞所具有的各个不同的表现型。 时间上的分化:一个细胞在不同的发育阶段上可以有不同的形态结构和功能; 空间上的分化:对于多细胞生物来讲,同一细胞后代,由于所处的环境不同而可以有相异的形态结构和功能。 1.细胞分化与基因组变化 细胞分化过程中,可以观察到的最常见的变化是染色体的反复复制,而并不进行细胞分裂。核内染色体的复制过程可以区分出两种主要类型,一是核内有丝分裂,导致核内多倍体,二是大量复制染色线,导致形成多线染色体。 在植物的分化发育中,另一类基因组的变化是基因重排。例如,在玉米、金鱼草等植物中,转座子的移动能引起很多发育性状的改变, 2.细胞分化与极性建立 极性是指植物的器官、组织、甚至单个细胞在不同的轴向上存在的某种形态结构以及生理生化上的梯度差异。 在很多情况下,细胞的不均等分裂是是细胞极性建立的标志。 无论是在活体还是在离体条件下,目前一般认为,极性的建立和维管成分的产生,是植物细胞分化的基本特征。 3.影响细胞分化的因素 a.激素 生长素能促进维管组织形成 细胞分裂素与木质部的发生有关 三. 影响器官分化的因素 一.离体培养中器官发生的方式 §2.器官发生 植物的离体器官的发生:培养条件下的组织或细胞团(愈伤组织)分化形成不定根(adventitious roots)、不定芽( adventitious shoots)等器官的过程。 不定根:从茎、叶上生出的根叫做不定根 不定芽:不是从叶腋或枝顶发出,而是从叶子、根上或从树干上发出的芽 通过器官发生形成再生植株大体上有三种方式: 第一种方式是先芽后根;如小麦,芦荟、苹果 第二种方式为先根后芽;如枸杞、苜蓿等 第三种方式是在愈伤组织的不同部位形成芽和根,再通过维管组织的联系形成完整植株。如胡萝卜、石刁柏 外植体不经过典型的愈伤组织即可形成器官原基,这一途径有两种情况,一是外植体中已存在器官原基,进一步培养即形成相应组织器官进而再生植株,另一种情况是外植体形成分生细胞团后在分生细胞团上直接形成器官原基。 外植体的部位直接影响器官分化的类型。例如:芦荟 外植体的状态和组织类型影响诱导和分化的难易; .外植体- 位置、状态及组织类型(芦荟、小麦) 三.影响器官分化的因素 3.离体培养下的遗传与变异 一、培养细胞变异的类型 二、变异原因: 三.影响离体培养细胞遗传变异的因子 四.体细胞无性系变异的诱导 五、优良变异的筛选方法 六.体细胞无性系变异的利用 七、变异的抑制 变异,由于离体培养条件下并没有发生雌雄配子的重组和交换,因此,这些变异的发生可以说均属于突变的范畴,由于它们没有发生有性过程,因此,我们把在组织培养条件下所表现的遗传与变异特征称之为体细胞遗传与变异,由此发展起来的一个新的遗传学分枝称为体细胞遗传学。 离体培养中,组织、细胞、原生质体培养再生植株中,会有各种各样的变异。例如,叶色、花色的变异,株高、果实大小的变异,染色体结构和数目的 五、优良变异的筛选方法 突变体用于基因克隆和功能鉴定早已成为模式植物如拟南芥等的常规方法,近年来也已开始广泛用于其它作物中。特别是与转座子标签插入突变技术相结合,更显现出这一途径的高效性。目前,利用突变体策略已分离出一些功能基因和抗病基因,如玉米乙醇脱氢酶基因ADH,赤霉素合成相关基因GA1、GA4,生长素敏感性基因AUX1、AUX2、番茄抗病基因Df9等。 培养细胞变异的类型1、自发产生的变异,即培养物在未加诱变因素的情况下产生变异。2、诱发产生的变异,即培养物在诱变因素作用下产生变异。前者变异率一般在10-7~10-6之间,后者一般在10-5~10-4。 1、自发产生的变异 A.染色体多倍性和非整倍性 B.畸形变异 最常见的变异是白化苗突变,其次是产生丛生芽、肉质茎芽等。 ??????????????????????????????????????????????????????????????????????????? ????????????????????????????????????????????????????????????????????????????? ????????????????????????????????
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