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RNA干扰在肿瘤治疗中的研究发展 孙源慧 于海燕 魏亚萍 赵倩 摘要　RNA干扰(RNA interference, RNAi)是指在进化过程中高度保守的、由双链RNA(double-stranded RNA, dsRNA)诱发的、同源mRNA高效特异性降解的现象。RNAi的作用提供了一种经济、快捷、高效的抑制特异基因表达的技术手段，有助于研究该基因在生物模型系统中的作用，是研究基因功能的重要工具, 通过RNA i技术可以选择性地抑制人类肿瘤相关基因的表达, 从而抑制肿瘤细胞的生长。该技术的应用为癌症的基因治疗提供了新的方法。 关键词：RNA干扰；细胞周期 肿瘤 沉默基因 siRNA RNAi技术 癌基因 抑癌基因 Abstract ：RNA interference (RNA devices, RNAi) refers to in the evolutionary process highly conservative, by double-stranded RNA (double stranded RNA, dsRNA) - induced, homology mRNA efficient specificity degradation phenomenon. The role of RNAi provides an economic, fast and efficient inhibiting specific gene expression techniques help to study the genes in biology model system of function, is the important function of the gene research tools. In cancer research, through the RNA I technology can selectively restrain human tumor related gene expression, thus inhibiting tumor cell growth. The application of the technology for cancer gene therapy provides a new method Key word ： RNAinterference siRNA RNA cancer Silence gene RNAi technology Cancer gene Tumor-suppressor genes Cell cycle Homologous mRNA 前言: RNA干扰( RNA interference, RNAi)是近年来发现的在生物体内普遍存在的一种古老的生物学现象, 是由dsRNA介导的、特定酶参与的特异性基因沉默现象,它在转录水平、转录后水平和翻译水平上阻断基因的表达。RNAi是真核生物体抵杭外源基因(如病毒基因、转座子、人工转入基因等)入侵的一种保护性反应, 它还是生物体在不同时期通过调控基因表达来调节细胞分化的机制。RNAi已成为一种极为有用的使基因失活的工具, 应用于多方面的研究中。肿瘤是一个多因素多步骤的发病过程, 涉及到多种分子特别是基因的改变。RNAi的特点就是它能同时针对基因起作用, 这为运用它来治疗肿瘤提供了机会。 1 RNA干扰与卵巢癌 1— 1 恶性肿瘤细胞要实现转移, 必须突破由细胞外基质和基底膜构成的组织屏障, 因HPSE 具有降解硫酸乙酰肝素蛋白多聚糖(HSPG s)的能力, 所以在转移过程中具有重要意义。RNA i具有高度的序列专一性和有效性, 即只抑制与双链RNA ( dsR??NA )同源的基因, 可以特异性地使基因沉默, 从而使基因功能丧失或基因表达量降低。 1 — 2 构建HPSE siRNA 真核表达载体, 将其导入卵巢癌细胞, 通过筛选能够获得稳定长期的表达干扰效果，用荧光定量PCR 检测HPSE 基因抑制情况。siRNA 是RNA i中的效应分子, 为短片段双链RNA结构, 能以同源互补序列的mRNA 作为反应靶目标。RNA i除了通过促使mRNA 降解以在转录后调控外, 也能引起转录水平的基因沉默( transcription gene silencing, TGS )。其机制是由dsRNA 降解成的21~ 23个核苷酸长的siRNA 小分子, 在细胞核中可以诱发同源序列DNA 的甲基化( RNA2 d irected DNA methy lation, RdDM ), 使靶启动子失去功能, 导致下游基因转录沉默[ 1] 。所以