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钙蛋白酶与阿尔茨海默病关系的研究进展_医学论文 钙蛋白酶与阿尔茨海默病关系的研究进展_医学论文 【关键词】 阿尔茨海默病 tau蛋白质类 淀粉样β蛋白 细胞凋亡 综述(文献类型) 钙蛋白酶是一种胞内Ca2+依赖性的、水解半胱氨酸的蛋白酶家族[1通过特异性蛋白水解酶作用调节多种酶和蛋白质的功能,包括信号传导分子和细胞骨架蛋白等,在细胞活动、信号传导、稳定细胞骨架结构等方面发挥作用。钙蛋白酶在神经系统广泛分布,阿尔茨海默病(AD)是一种慢性进行性神经系统退行性疾病,临床特点为进行性痴呆,表现为智力、记忆力、定向力、推理和判断能力等不可逆性退化主要病理改变为大量的β淀粉样蛋白(β沉积形成的神经炎性斑块、过度磷酸化的tau蛋白聚集形成的神经原纤维缠结(neurofibrillary tangle,NFT)以及选择性的神经元丧失。近期研究表明，钙蛋白酶功能失调可能在AD的发病过程中发挥重要作用。笔者就钙蛋白酶的结构、活性调节以及在AD的NFT和Aβ病理形成中的作用做一综述。 1钙蛋白酶/钙蛋白酶抑制蛋白的结构 1.1钙蛋白酶的结构至今已证实钙蛋白酶家族成员有14个[3]。钙蛋白酶Ⅰ和钙蛋白酶Ⅱ是研究最多的2类钙蛋白酶超家族成员,它们的区别主要在于体外激活时所需Ca2+浓度不同,后者在纯化状态下,需要毫摩尔浓度Ca2+才有最佳活性,而前者在微摩尔浓度Ca2+即可有最佳活性。钙蛋白酶由1个大亚基(80 kD)和1个小亚基(30 kD)组成异二聚体。大亚基有4个结构域(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ):结构域Ⅰ位于N末端,Ca2+与酶结合后,结构域Ⅰ可发生自我水解,引起蛋白酶构象改变结构域Ⅱ是蛋白酶活性区,有木瓜蛋白酶样的结构,由Cys105、His262、Asn286 3个氨基酸残基组成酶的活性中心结构域Ⅲ是抑制蛋白或激活蛋白结合的部位结构域Ⅳ是Ca2+结合的部位。小亚基有2个结构域,结构域Ⅰ富含甘氨酸和疏水氨基酸,是酶与细胞膜结合的部位结构域Ⅱ与大亚基结构域Ⅳ结构相似,也含有Ca2+结合位点。 1.2钙蛋白酶抑制蛋白的结构钙蛋白酶抑制蛋白是一特异性内源性抑制剂蛋白,与钙蛋白酶共存,构成钙蛋白酶/钙蛋白酶抑制蛋白系统，起负性调节作用。典型的钙蛋白酶抑制蛋白分子有5个结构域,Ⅰ区为氨基末端,Ⅱ~Ⅴ区均含有同源性序列Thr代表任何一种氨基酸),是对钙蛋白酶起抑制作用的关键部位,为抑制区。 2钙蛋白酶活性的调节 钙蛋白酶以一种无活性的酶原形式存在,构成酶活性中心的氨基酸残基(cys105,his262,asn286)彼此分离,无法形成酶活性中心,蛋白酶的激活需要通过构象的改变,使残基相互接近形成酶活性中心。 2.1钙蛋白酶的激活钙蛋白酶活性受到严格调控,其中Ca2+的作用最为重要。细胞内游离Ca2+浓度([Ca2+]i)升高使钙蛋白酶大亚基结构域Ⅰ自我水解,构象改变,形成酶活性中心,表现出蛋白酶活性[4。 钙蛋白酶在膜上的定位也是调节其活性的重要机制,早期研究认为,钙蛋白酶一旦与质膜结合,即可由非活性状态转变成活性状态,然而其他研究表明,钙蛋白酶Ⅰ与钙蛋白酶Ⅱ在自我水解前即有活性。通过与膜相互作用使钙蛋白酶在膜上被活化,钙蛋白酶即进入胞质并能抵御钙蛋白酶抑制蛋白的抑制作用。活化的钙蛋白酶可在膜上或胞质降解底物蛋白[6。 钙蛋白酶自我水解所需的Ca2+浓度与表现酶蛋白水解活性所需要的Ca2+浓度相近却比活细胞中[Ca2+]i水平要高得多。如何启动激活钙蛋白酶？解决矛盾的办法在于发现了磷脂的存在。在磷脂酰肌醇存在情况下,激活钙蛋白酶所需的Ca2+浓度大为降低。 2.2钙蛋白酶的磷酸化调节研究表明,钙蛋白酶序列内含有许多磷酸化作用位点,钙蛋白酶Ⅰ有9个磷酸化位点,钙蛋白酶Ⅱ有8个磷酸化位点,这些磷酸化位点均位于80 kD亚基上[9],并主要集中于两个区域:结构域Ⅰ和Ⅱ结合处(Ⅱa)及结构域Ⅱ氨基末端(Ⅱb)。上皮生长因子(EGF)刺激细胞通过Erk/MAP激酶信号通路来激活钙蛋白酶[10],通过上皮生长因子信号通路激活的钙蛋白酶又可被蛋白激酶A的磷酸化作用所抑制[11。 2.3钙蛋白酶活化蛋白与活性的负调节1987年Pontremoli报道,isovalerylcarnitine可降低钙蛋白酶Ⅱ发挥最大催化活性所需的Ca2+浓度,同时可使其活性增加1.5倍,但不降低钙蛋白酶Ⅰ发挥最大催化活性所需的Ca2+浓度或者增加活性。此后Melloni等从小鼠的骨骼肌细胞中分离得到一也具有相似作用的热稳定多肽calpain activator。此后研究表明calpain activator是相对分子质量30 kD的二聚体,其氨基酸顺序及功能均与羊肝脏蛋白UK114一样。 钙蛋白酶抑制蛋白可识别钙蛋白酶与钙结合形成的构象变化,并与之特异结合。当钙蛋白酶被Ca