杜仲雄花HPLC指纹图谱与成分积累规律的研究.pdfVIP

2012中国杜仲产业发展高峰论坛 2012China Indus廿y Forum DuzhongDevelopment 杜仲雄花I-IPLC指纹图谱及成分积累规律的研究 叶东旭1’2，杜红岩3，李钦。2上，杜兰英3，付建敏3 3．中国林业科学研究院经济林研究开发中心，河南郑州450003) i tech 摘要：目的：建立杜仲雄花的HPLC指纹图谱，分析杜仲雄花中成分的积累规律。方法：采用Amer C，。(250mm×4．6mm，5u n：柱温 m)色谱柱，流动相：甲醇-0．05％磷酸溶液．梯度洗脱；流速：1．OmL／mi 25℃：检测波长238nm。结果：对不同日期采集的杜仲雄花的指纹图谱进行评价，生成对照指纹图 谱，确定了18个共有峰。杜仲雄花的成分积累规律为：京尼平苷酸含量花蕾期最低，至盛花期最高。 绿原酸含量花蕾期最高，盛花期最低，末花期含量上升。京尼平苷含量始花期最低，盛花期最高。 杜仲雄花的盛花期是兼顾质量和产量的最佳采摘期。 结论：杜仲雄花的指纹图谱可为杜仲雄花的质量控制及最佳采收期的确定提供参考。 杜仲(EucomiaulmoidesOliv．)为杜仲科杜仲属多年牛落叶乔木，是我国特有 的名贵树种“’。杜仲是雌雄异株植物，杜仲雄花产量高。研究表明，杜仲雄花中富含与 杜仲叶、杜仲皮相类似的绿原酸、京尼平苷酸、京尼平：苷、桃叶珊瑚苷、黄酮类化合 物等活性物质心’3，是亟待开发的一个新资源。目前，有关杜仲中次生代谢物的时空差异 研究已有诸多报道H。，而对杜仲雄花的次生代谢产物的研究很少，雄花中次生代谢产物 合成积累动态也未见报道哺。。而以杜仲雄花为原料研制和开发的产品如杜仲雄花茶，已 陆续投放市场，并受到了国内和日本、东南亚等国家和地区消费者的青睐n‘，随之而来 的是质量监控问题。为此，本文建立了杜仲雄花药材的HPLC指纹图谱分析方法∽。，并探 讨了杜仲雄花次牛代谢成分积累规律。为杜仲雄花及其相关产品的质量控制提供参考。 1、仪器与试药 平)：电热鼓风干燥箱(101—2AB型，天津市泰斯特仪器有限公司)。 苷酸对照品(日本和光纯药业株式会社，批号PER2862，供含量测定用)；京尼平苷对 照品(中国药品生物制品检定所，批号110749-200613，供含量测定用)。甲醇为色谱纯， 水为超纯水，其他试剂为分析纯。杜仲雄花(1～7号)均采自中国林业科学研究院经济 林研究开发中心洛阳杜仲种植基地，采集的雄花均来自同一杜仲良种(华仲1号)，选择 次，每次选择树冠中部外围随机采集杜仲雄花各100g，采集后均自然风干，再采用电 热鼓风干燥箱60。C干燥3小时，粉碎过4号筛。经河南大学药学院李钦教授鉴定为杜仲 uimoides 科植物杜仲(Eucommia 01iv．)的雄花，样品编号和采集时间见表1。 2012中国杜仲产业发展高峰论坛 2012China Forum DuzhongIndustry Development 2、方法与结果 u 2．1色谱条件 色谱柱：Ameritech(250ram×4．6mm，5m)，柱温：25℃：流动相：以 0．05％磷酸溶液为流动相A，甲醇为流动相B：按表2进行梯度洗脱；流速：1．OmL／min： 检测波长：238nm；检测时间：70min。供试品溶液在此色谱条件下进样各峰分离情况良 好，所有组分均在70min内被检测完毕。 梯度洗脱程序(如表2)： 表2 梯度洗脱程序表 2．2对照品溶液的制备取绿原酸对照品适量，精密称定，用50％甲醇溶解并稀释至刻 度，摇匀，制成0．407mg／mL的溶液(置棕色容量瓶中)；另取京尼平苷酸和京尼平苷适 um 滤膜滤过，即得。 2．3供试品溶液的制备 取杜仲雄花样品，研细，过四号筛，取约0．59，精密称定，置 具塞锥形瓶中，精密加入50％