对动物组织DNA提取方法的改进及PCR检测.pdfVIP

( ) 第 32 卷第 3期 浙江师范大学学报 自然科学版 Vol. 32 , No. 3 ( ) 2009年 9 月 　　　　　　Journal of Zhej iang Norm al U n iversity N at. Sci. 　　　　　　 Sep. 2009 　　文章编号 : 100 15051 (2009) 0303 1705 对动物组织 DNA 提取方法的改进及 PCR 检测 鲍毅新 , 　孙 　波 , 　张龙龙 , 　赵庆洋 (浙江师范大学 生态研究所 ,浙江 金华 　32 1004 ) 摘 　要 : 以小型哺乳动物社鼠为例 ,通过调整酚与氯仿的比率 、减少抽提次数及消化时间 ,对采用 - 70 ℃超低 温冰箱 、- 20 ℃低温冰箱 、70%乙醇液浸泡 、95%乙醇液浸泡和含 50 mmo l/L 乙二胺四乙酸二钠的 70% 乙醇 液浸泡等不同方法保存的社鼠肌肉组织提取基因组 DNA ,并对其进行微卫星指纹图谱分析 ,研究了改进方法 对不同方法保存的社鼠肌肉组织提取 DNA 的效果 ,并比较了不同保存方法对 DNA 提取效果的影响. 结果表 明:改进方法可行 ,完全可以满足微卫星等分子标记技术的需要. 关键词 :社鼠; DNA 提取 ;聚合酶链反应 ;动物组织 ;样品保存 中图分类号 : Q953　　　　文献标识码 : A The im provem en t for m ethod of D NA extraction from an im a l tissue and PCR detection BAO Yixin , 　SUN Bo, 　ZHAN G Longlong, 　ZHAO Q ingyang ( Institu te of E cology, Z hej iang N orm a l Un iversity, J inhua Z hej iang 　32 1004, Ch ina) A b stract: It wa s u sed the tissue of N iviven ter conf ucianus by differen t p re serving m ethod to extract DNA , th rough adju sting the ratio of p heno l and ch loroform , reducing extraction and dige stion tim e. The tissue were p re served in differen t way including - 70 ℃ refrigeration , - 20 ℃ refrigeration , 70% alcoho l soak , 95% al coho l soak and 70% alcoho l soak w ith 50 mmo l/L ED TA. M icro satellite fingerp rin t wa s u sed to detect the ex tracted genom e DNA in order to study th