黄连、黄芩提取物对小鼠胸腺细胞凋亡的影响地研究初报.pdfVIP

黄连、黄芩提取物对小鼠胸腺细胞凋亡的影响 的研究初报 曾芸1房慧伶李翔 (广西大学动物科学技术学院广西南宁530005) 摘 要： 采用光学显微镜法，分别观察黄连、黄苓提取物时地塞米松诱导的小鼠胸腺细 胞凋亡的影响，结果发现不同试验纽之阔的胸雕细胞形态差异，从细胞形态变化可以初步判 定，黄芩提取物能促进地塞束松谤导的胸雎细胞凋亡，黄连提取物对地塞米松诱导的胸腺细 胞凋亡有抑制作用，其作用还有待于进一步的研究。 关键词： 黄连黄芩胸腺细胞凋亡 细胞凋亡是由基因控制的细胞自主性死亡，是细胞的一种基本生命现象，贯穿了个 体生长、发育直至死亡的整个生命过程。近年来的研究表明许多生物活性物质及药物， 对胸腺细胞凋亡有一定的影响，张新等报道枸杞多糖具有抑制小鼠胸腺细胞自发凋亡的 作用…，张洪勤、李嫔等分别观察到酵母提取物、广枣总黄酮均能抑制地塞米松引起的小 鼠胸腺细胞的凋亡“““，为药物的研究开发与疾病防治开辟了广阔的研究领域。 本研究选用兽医l临床广泛应用的清热解毒中草药黄连、黄芩，用常规方法提取其中 有效成分，在光学显微镜下观察它们对人工诱导的小鼠胸腺细胞凋亡作用的影响，为中 草药防治疾病的药理机制提供现代理论依据。 l材料与方法 1．1主要试剂 地塞米松注射液，天津药业集留新郑股份有限公司，生产批 黄连与黄芩均购自南宁市医药公司； 1．2试验动物 昆明种小白鼠24只，4～6周龄，体重20～249，由广西中医学院动物实验中心提供。 1．3试验分组 动物随机分为4组，即黄连提取物组、黄芩提取物组、凋亡对照组和正常对照组， 每组6只，分笼饲养，自然光照，自由采食和饮水。 I．4试验方法 1．4，l药液制备…嘲 黄芩，用水煎煮，盐酸沉淀，乙醇精制得黄芩总甙，最后制成相当于含生药0．59／ml 的黄芩甙注射液。 黄连，用硫酸浸泡后渗漉，石灰乳沉淀，盐酸精制，最后制成相当于含生药0，59／ml 的黄芩甙注射液。 ．．79-． 1．4．2给药与取材：给药量按等效剂量直接折算法…。 黄连提取物组：腹腔注射，每日1次，连用5日，给药量为坞．75mg／lOg。 黄芩提取物组：腹腔注射，每日1次，连用5日，给药量为12．5mg／lOg。 凋亡对照组和正常对照组：馥腔注射等体积灭菌水，每天1次，共5目。 第5日上述各组分别按o．2mg／lOg体重给药量腹腔注射地塞米松，15小时后采取胸 腺，用10％的福尔马林固定各Jl}I。 1．4．3组织切片的制作与观察 流水冲洗，梯度酒精脱水，石蜡包埋，切片厚度4uIll，HE染色，光学显微镜观察。 2结果 2．1正常对照组的胸腺细胞体积中等大小，呈圆形或椭圆形，胞膜完接光滑，胞核比例 大，核质致密，染成紫红色，胞浆量少。 2．2凋亡对照组的胸腺细胞染色质凝集呈新月状，或固缩成团块；或细胞膜以出芽方式 包被着细胞核碎片、细胞质及细胞器形成凋亡小体。 2．3黄连提取物组细胞与正常对照组相比，胸腺细胞体积略缩小，染色质浓缩，但看不 到典型的细胞凋亡形态。 2．4黄芩提取物组胸腺细胞多数凋亡，呈典型的凋亡特征。多见凋亡小体和巨噬细胞吞 噬凋亡小体。 3小结与讨论 3．1根据光学显微镜观察结果可以初步认为黄连提取物对地塞米松诱导的胸腺细胞凋亡有 抑制作用，而黄芩提取物则具有促进作用，其作用还有待于用其他方法进一步验证与研究． 3．2黄连提取物对地塞米松诱导的胸腺细胞凋亡有抑制作用，对病毒性疾病导致的免疫 细胞凋亡是否具有同样的作用，这需要进一步进的研究。 3．3 胡聪等人的研究表明黄芩苷对肿瘤坏死因子和放线菌素诱导的肝细胞凋亡有抑制 作用”I，本研究结果显示黄芩提取物对地塞米松诱导的胸腺细胞凋亡却具有促进作用，同 一药物对不同的细胞凋亡作用相反，这是需要进一步研究与探讨的问题。 3．4黄连、黄芩均为清热解毒药，从免疫学角度研究发现，两者对淋巴细胞的转化及巨 噬细胞的吞噬能力均有促进作用”’，本试验从细胞凋亡角度研究发现两者作用却相反，这 对中医理论具有很大的挑战。 参考文献： [1]张新，项树林，尹亿民等．枸杞多糖对小鼠胸腺细胞程序化死亡的影响，中华微生