茶叶β-葡萄糖苷酶的亲和层析纯化和性质研究.pdfVIP

茶叶p一葡萄糖苷酶的亲和层析 纯化与性质研究 ， 张正竹 宛晓春1，坂田完三2 (1．安徽农业大学农业部茶叶生物化学与生物技术重点开放实验室，合肥230036；2．京都大学化学 研究所，日本京都，611．0011) 摘要：以化学合成的B一葡萄糖苷酶的抑制剂(13-葡萄糖脒)为配体，通过Ⅳ-糖苷键交 联到支持物上，使糖脒M糖苷键一侧的氨基保持带正电荷的活化状态，合成了一种p一 葡萄糖苷酶的亲和层析树脂。这种合成的亲和层析树脂在弱酸条件下非常稳定，能选 择性地吸附8一葡萄糖苷酶，并能多次重复使用达20次以上。利用这种亲和层析树脂， kDa 5条件下，从薮北种茶树叶片中纯化出两种分子量分别为63和75 在pH6和pH 的p一葡萄糖苷酶单体酶。以对硝基苯酚p一葡萄糖苷为底物，研究了两种酶的性质。TLC 分析结果表明，这两种D一葡萄糖苷酶都能水解(z)．3．己烯醇、苯甲醇和苯乙腈p—D一葡萄 糖苷。