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2017-08-17 发布于湖北
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总RNA提取方法的比较与分析.pdf

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25 Vol. 25 2009 12 WUY I SCIENCE JOURNA L De . 2009 : 100 14276( 2009) RNA * , , , (福建农林大学生命科学学院, 福建福州 350002) : TRIZOLCTA B RNA, RNA OD260nm /OD280nm 1. 8961. 992 1. 657, RNA , TR IZOL RNA , CTAB RNA , CTAB RNA : RNA; ; CTAB : Q522 : A RNA, N orthernDNA DNA RNA[ 1- 12] RNA , , , , [ 2] RNA , RN aseRNase [ 7] [ 8] mRNA RNA [ 9] [ 10] [ 3] [ 4] L iC l- Gomez CTAB [ 5] [ 13] TR IZOL TR IZOL CTAB , RNA , 1 1. 1 , - 70 ( DEPC)TR IZOL 0. 1% DEPC, 200 6 h; , 0. 1% DEPC , 1. 034 10 Pa 30 m in, DEPC, , 1. 034 10 Pa30 m in, 3% 2 h, 0. 1% DEPC ; /( 1: 1) 1 h 1. 2 [ 13] TR IZOL : 50 mg 1mL RNA isoReagent, : 2009 - 03- 10 : * 福建省自然科学基金项目( 2007J0243, X0750005)福建省教育厅科技计划项目( JA07059) : 林玲, 女, 1982( - ) , 助教, 研究方向: 微生物学与分子生物学方的教学与科研工作 * : E - ma i:l w shyyl@ sina. om 98 24 5 m in; 200 L, 5 m in; 12000 g4 10 m in , , , 10 m in; 12000 g4 10 m in 75% 1 mL ; 12000 g4 5 m in, [ 4] [ 5] ; 30 L DEPCCTAB DNA : RNA 4 L, O ligo- d ( T ) 18 1 L, ddH2O 5 L; 95 10 m in, - 20 5 m inRNA ( Rnase) 1 L, 5 T aq PCR Buffer 5 L, dd H2O 7 L, dNTP1 L, ( AMV ) 1 L, 25 L, 48 1 h RT - PCR: A tin, Prmi er 5. 0 : P1: 5 - CGTCTGCGATAATGGAACTGGTA - 3,P2: 5 - AACTTT GTCCACGCTAATCAAGAA- 3 PCR : 5 PCR Buffer 4 L, d NTP 0. 5 L, 1 L , D NA 2 L, T aq 0. 5 L, 25 LPCR: 94 5 m in,