2章（发酵动力学产酶）.pptVIP

2.4 酶生产过程的动力学 发酵动力学主要研究发酵过程中细胞生长速度、产物生成速度、基质消耗速度以及环境因素对这些速度的影响等。 研究细胞生长动力学和发酵产酶动力学，对酶的生物合成模式、发酵工艺条件的优化控制，提高酶的产率等方面均具有重要意义。 1、酶生物合成的模式 p35 根据酶的合成与细胞生长之间的关系，可将酶的生物合成分为3种模式，即 ： 同步合成型 生长偶联型—— 中期合成型 部分生长偶联型——延续合成型 非生长偶联型 —— 滞后合成型 总结：影响酶生物合成模式的主要因素 1）mRNA的稳定性 （好、差） 2）培养基中阻遏物的存在 不受阻遏：随着细胞的生长而开始酶的合成。 受阻遏：细胞生长一段时间或平衡期后，酶才开始合成。 酶生产中最理想的合成模式 2、酶生产过程中细胞生长动力学 细胞在控制一定条件的培养基中生长的过程中,其生长速度受到细胞内外各种因素的影响,变化比较复杂，情况各不相同。 细胞生长动力学主要研究细胞生长速度以及外界环境因素对细胞生长速度影响的规律。1950年，法国的莫诺德(Monod)首先提出了表述微生物细胞生长的动力学方程。 营养物浓度（生长限制基质浓度）和生长速率之间的动力学关系：Monod模型 μ:比生长速率（1/h） （specific growth rate） μmax：最大比生长速率（1/h） S：营养物浓度（生长限制基质浓度） 克/L Ks：莫诺德常数或饱和常数或营养物利用常数 克/L，或 mol/L 莫诺德方程与酶反应动力学的米氏方程相似，其最大比生长速率μ和莫诺德常数也可以通过双倒数作图法求出 1 Ks 1 = + μ μmS μm 3、产酶动力学 产酶动力学主要研究细胞产酶速率以及各种环境因素对产酶速率的影响规律。 产酶动力学的研究可以从整个发酵系统着眼，研究群体细胞的产酶速率及其影响因素，这称为宏观产酶动力学或这称为非结构动力学。 也可以从细胞内部着眼，研究细胞中酶合成速率及其影响因素，这谓之微观产酶动力学或称为结构动力学。 宏观产酶动力学。 宏观产酶动力学的研究表明，产酶速率与细胞比生长速率、细胞浓度以及细胞产酶模式有关。产酶动力学模型或称为产酶动力学方程可以表达为： 根据细胞产酶模式的不同，产酶速率与细胞生长速率的关系也有所不同。 同步合成型的酶，其产酶与细胞生长偶联。在平衡期产酶速率为零，即非生长偶联的比产酶速率β=0。所以其产酶动力学方程为： 滞后合成型的酶，为非生长偶联型，生长偶联的比产酶系数α=0，其产酶动力学方程为： 2.5 固定化微生物细胞发酵产酶 固定化细胞的概念: 固定化活细胞、固定化增殖细胞。指采用各种方法固定在载体上，在一定的空间范围进行生长、繁殖和新陈代谢的细胞。 是20世纪70年代后期发展的技术 特点 产酶率提高 可以反复使用或连续使用较长时间 基因工程菌的质粒稳定，不易丢失 发酵稳定性好 缩短发酵周期，提高设备利用率 产品容易分离纯化 适用于胞外酶等胞外产物的生产 固定化细胞发酵工艺条件及其控制 固定化细胞的预培养(固定化细胞制备好以后，一般要进行预培养，以利于固定在载体上的细胞生长繁殖。) 溶解氧的供给 ◆由于受到载体的影响, 氧的供给成为主要的限制性因素。 ◆由于固定化细胞反应器都不能采用强烈的搅拌，以免固定化细胞受到破坏，所以，增加溶解氧的方法主要是加大通气量。 ◆可以通过改变固定化载体、固定化技术或者改变培养基组分等方法，以改善供氧效果。 温度的控制(固定化细胞对温度的适应范围较宽，在分批发酵和半连续发酵过程中不难控制 ) 培养基组分的控制 固定化细胞生长和产酶动力学 固定在载体上的细胞以一定的速度生长。在达到平衡期以后的相当长的一段时间内，固定化细胞的浓度基本保持恒定。同时，随着细胞的生长和繁殖，有一些细胞泄漏到培养液中，这些泄漏细胞则是游离细胞，它们也在培养液中生长繁殖。 从图中可以看到， 在固定化细胞的培养系统中，细胞包括固定在载体上的细胞和游离细胞两部分。其生长速率也由两部分组成。即： dX