以Ad41为载体的轮状病毒VP6基因重组腺病毒的遗传稳定性研究.pdfVIP

·422· ．论著 以Ad41为载体的轮状病毒VP6基因 重组腺病毒的遗传稳定性研究 王敏，陈多灵，宋敬东，屈建国，鲁茁壮，赵蔚明，洪涛 【摘要1 目的对前期制备的以Ad4l为载体的可表达A组轮状病毒VP6基因的非复制型重 组腺病毒进行连续传代，观察其遗传稳定性，为进一步研发疫苗做准备。方法 在293TE7细胞上， 对本室前期构建的重组腺病毒rvAd41．VP6(O)连续传代14代，每隔2代通过PCR鉴定VP6(O)基因 的插入，通过WesternBlot技术鉴定目的蛋白的表达。结果PCR分析表明，rvAd41一VP6(O)在连续 传代的过程中，其基因组中都有特异性的VP6基因稳定整合；WesternBlot证实了rvAd41-VP6(O)可 稳定表达VP6，这说明rvAd41-VP6(O)有较好的遗传稳定性。结论重组腺病毒rvAd41一VP6(O)在 体外具有良好的生物学性质，可用于下一步动物免疫研究。 【主题词】腺病毒；轮状病毒属；基因；遗传学，微生物 The ofrecombinantadenovirus humanrotavirusVP6 whichused geneticstability expressing gene vectorWANG Ad41as Min。，CHENDuo—ling，SONGJing—dong，QUJian—guo，LUZhuo·zhuang，ZHAO Tao．’InstituteViralDiseaseControland CenterDiseaseControl Wei—ming，HONG for Prevention，Chinesefor and Prevention，Be讲ng100052，China author：WANG Corresponding Wei·ming，Email：zhaowm@sdu． Min，Email：minw一12@163．com；ZHAO edM．cn adenovirus To the of recombinant 【Abstract】Objectiveinvestigategeneticstabilitynon-replicating Ad41asvectorandcould VP6 of Arotaviruscontinous whichused expressgenegroup during passage，in Therecombinantadenovirus orderto thevaccineofrotavirus．Methods rvAd41．VP6(O)was develop our thenwas on293TE7cellsfor14 by laboratoryearly，it continuouslypropagated passages．After prepared 2 for ofthe that oftheinfectedcellswerecollectedat thedetectionofthe samples everypassages integration wasdetected Blot VP6 the ofthe Western