体外诊断试剂生产及质量控制技术指导原则——核酸检测试剂生产及质量控制技术指导原则_百替生物.pdfVIP

3 3 附件33： 体外诊断试剂生产及质量控制技术指导原则 —— —— ————核酸检测试剂生产及质量控制技术指导原则 核酸扩增检测技术泛指以扩增DNA 或RNA 为手段，从而筛查特定基因 的检测技术，如聚合酶链反应（PCR）、连接酶链反应（LCR）、转录依赖的扩 增反应（TMA）等。核酸检测试剂是基于核酸扩增检测技术的体外诊断试剂， 目前已经用于病原体检测、特定疾病的早期诊断和体内物质的型别鉴定等不 同领域。为规范核酸检测试剂的生产及质量控制，特制定本技术指导原则。 国家药品监督管理部门将依据科学技术发展的需要，适时组织修订。 一、基本要求 （一）核酸类检测试剂生产用的各种原料、辅料等应制定其相应的质量 标准，并应符合有关法规的要求。 （二）核酸类检测试剂的生产企业应具备相应的专业技术人员、仪器设 备以及适宜的生产环境（实验室应当严格分区，人员和物品应当单向流动， 以最大限度地防止实验过程中样品之间的污染和避免扩增产物的污染），获得 《医疗器械生产许可证》；同时，应按照《体外诊断试剂生产实施细则（试行）》 的要求建立相应的质量管理体系，形成文件和记录，加以实施并保持有效运 行；还应通过《体外诊断试剂生产企业质量管理体系考核评定标准（试行）》 的考核。企业应对试剂的使用范围作出明确规定，并经国家药品管理部门批 准。 （三）核酸类检测试剂在研制时，应当遵循科学、规范的原则，引物设 service@100 service@100 wwwwww..110000bbiiootteecchh..ccoomm sseerrvviiccee@@110000bbiiootteecchh..ccoomm 计应当符合核酸检测设计的要求，扩增体系应设定合理的内标和外标，试剂 须设置抗污染的特定措施，扩增产物须进行确证研究。 （四）核酸类检测试剂生产过程中所用的各种材料及工艺，应充分考虑 可能涉及的安全性方面的事宜。 （五）生产和质量控制的总体目标：保证试剂使用安全、质量稳定、工 艺可控、检测有效。 二、原材料 应提供主要原材料如引物、探针、企业参考品或标准品等的选择与来源、 制备过程、质量分析和质量标准等的相关研究资料。如果主要原材料来自市 场（从其他单位购买），应提供的资料包括：对物料供应商审核的相关资料、 购买合同、供货方提供的质量标准、出厂检验报告，以及该原材料到货后的 质量检验资料。如果主要原材料（包括工艺）或其供应商有变更，应依据国 家相关法规的要求进行变更申请。 核酸类检测试剂的包装材料和耗材应无DNase 和RNase 污染。 1．dNTPs 脱氧三磷酸核苷，核酸的组成成分，包括：dATP、dUTP、dGTP、dCTP 和dTTP。应为HPLC 纯、PCR 级，无DNase 和RNase 污染。-20℃保存。 2．引物 由一定数量的核苷酸构成的特定序列，通常采用DNA 合成仪人工合成， 合成后经聚丙烯酰胺凝胶电泳或其他适宜方法纯化。 冻干粉，合成量不低于试剂盒总测试样品所需量。序列正确。纯度应达 到电泳级（PAGE）或HPLC 级，不含杂带。应提供合成机构出具的合成产物 service@100 service@100 wwwwww..110000bbiiootteecchh..ccoomm sseerrvviiccee@@110000bbiiootteecchh..ccoomm 的质检证明，如PAGE 电泳结果或HPLC 分析图谱。 应作 HPLC 分析和紫外光吸收分析。以紫外分光光度计测定 OD260nm/OD280nm 的比值在1.6 2.0 之间，可视为合格引物。-20℃保存。 3．探针 是指特定的带有示踪物（标记物）的已知核酸片段（寡聚核苷酸片段）， 能与互补核酸序列退火杂交，用于特定核酸序列的探测。通常采用DNA 合成 仪人工合成，合成后经聚丙烯酰胺凝胶电泳