._DNA重组技术的基本工具课件.pptVIP

多克隆位点英文名称：multiple cloning site;polycloning site;MCS 定义：DNA载体序列上人工合成的一段序列，含有多个限制内切酶识别位点。能为外源DNA提供多种可插入的位置或插入方案。 一个切割位点 目的基因 一个切割位点 载体的条件⑴ 有1~多个限制酶切点 载体的条件⑵对受体细胞无害 ⑶能在受体细胞中复制和表达 载体的条件⑷具有标记基因 1 载体需要的条件： ⑴ 有1~多个限制酶切点 ⑵对受体细胞无害 ⑶导入基因能在受体细胞中复制或整合受体 细胞的DNA上、表达 ⑷有某些标记基因，便于筛选 三、“分子运输车” ——载体 2 常用运载体： ⑴细菌的质粒 ⑵λ噬菌体衍生物或某些动植物病毒。 有标记基因的存在，可用含青霉素的培养基鉴别。 有切割位点 能复制并带着插入的目的基因一起复制 裸露的、结构简单的、独立于细菌染色体（即拟核DNA）之外，并具有自我复制能力的很小的双链环状DNA分子。 最常用运载体——质粒 实际上在基因工程操作中，真正被用作载体的质粒，都是在天然质粒的基础上进行过人工改造的。 议一议 2、能否用SARS病毒作为基因载体？ 3、作为载体，若没有切割位点将怎样？ 4、携带目的基因的载体是否进入了受体细胞，如何鉴定？ 5、假如目的基因导入受体细胞后不能复制，将怎样？ 1、从化学组成来看，载体应含有什么成分？ 双