江苏省盐城市时杨中学2012-2013学年高二下学期生物《DNA的粗提取与鉴定》导学案 （人教版）.docVIP

《DNA的粗提取与鉴定》导学案 编制： 审核： 批准： 【学习目标】 1.简述DNA粗提取与鉴定的基本方法和原理。 2.概述DNA提取中去除杂质的方法和原理。 3、尝试对植物和动物组织中的DNA就行粗提取，并进行鉴定。 【问题情境】 1、DNA的鉴定原理？ 2、DNA粗提取实验材料选取的原则？ 3、破碎鸡血细胞，获取含DNA的滤液为什么加蒸馏水？ 4、破碎植物细胞加洗涤剂和食盐的作用分别是什么？ 5、为什么反复地溶解和析出DNA，能够去除杂质？ 6、DNA析出方法？ 【我的疑问】 备 注 第1页共4页 【自主探究】 （一）DNA粗提取的原理 1．DNA的溶解性 DNA在不同浓度 溶液中溶解度不同；DNA不溶于 。 2．将DNA和蛋白质进一步分离。 蛋白酶水解 而不会对DNA产生影响。 温度值为 ，蛋白质变性沉淀，而DNA不会变性。 洗涤剂将细胞膜上的 ，从而瓦解细胞膜。 （二）实验设计 1．实验材料 2．破碎细胞，获取含DNA的滤液 如是洋葱，加入一定量 溶解细胞膜；加入一定量的食盐，溶解DNA物质。 3．去除滤液中的杂质 方案一的原理是 ； 方案二的原理是 ； 方案三的原理是 。 4．DNA析出与鉴定 （三）．实验操作 制备鸡血细胞液…………加 ，静置或离心 ↓ 破碎细胞，释放DNA… 加 ，同一方向快速通方向搅拌 ↓→过滤，除去细胞壁、细胞膜等。 溶解核内DNA… 加入NaCl至 ，同一方向缓慢搅拌 ↓ DNA析出…加蒸馏水至 ，过滤，在溶解到2mol/L溶液中 ↓→除去细胞质中的大部分物质。 DNA初步纯化………… 与等体积 混合，析出白色丝状物 ↓→除去核蛋白、RNA、多糖等。 DNA鉴定……………… ，沸水浴，呈现蓝色 备 注 第2页共4页 【课堂检测】 （　　）1. 在DNA分子的粗提取实验中，两次向烧杯中加入蒸馏水的作用是 A. 稀释血液、冲洗样品 B. 使血细胞破裂，降低NaCl浓度使DNA析出 C. 使血细胞破裂，增大DNA溶解度 D. 使血细胞破裂，提取含杂质较少的DNA （ ）2（多选）与析出DNA粘稠物有关的叙述，正确的是 A.操作时缓缓滴加蒸馏水，降低DNA的溶解度 B.在操作A时，用玻璃棒轻缓搅拌（可以加速细胞的破裂），以保证DNA分子完整 C.加蒸馏水可同时降低DNA和蛋白质的溶解度，两者均可析出 D.当丝状粘稠物不再增加时，此时NaCl的浓度相当于0.14mol/L （ ）3（多选）关于DNA的粗提取与鉴定实验的表达哪项是正确的 A. 离心后除去血液中的上清液是为了除去杂质 B. 离心沉淀的血细胞中加水是为了提取DNA C.向溶解的DNA烧杯中加蒸馏水是漂洗DNA D. NaCl溶液的物质的量浓度为2mol/L时，DNA溶解 4．DNA在NaCl溶液中溶解度有二重性，随着NaCl溶液的变化而变化。 （1）请在下列NaCl溶液中选出溶解度能使DNA析出最彻底的一种（ ）和溶解度最高的一种（ ） A. 0.14mol/l B. 2mol/l C. 0.15mol/l D. 0.3mol/l （2）DNA不溶于酒精溶液，但细胞中的某些物质却可以溶于酒精溶液，利用这一原理可以____________，可以推测溶于酒精中的物质可能有____________。 （3）利用DNA与__ ___变蓝色的特性，将该物质作为鉴定___ ___的试剂。其实验过程要点是向放有_____的试管中加热4ml的___ _。混合均匀后，将试管置于___ 5min，待试管____ __，观察试管中溶液颜色的变化，这个实验也说明DNA耐__ _温。 【回标反馈】 备 注