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计划类别： 技术专项 指南代码： 180112 苏州市科技计划项目申报书 （科技支撑计划—工业） 项目名称： 乙肝病毒基因分型TRIFMA诊断试剂的研制 承担单位： 苏州新波生物技术有限公司 单位地址： 太仓市洛阳东路36号 邮编： 215400 项目负责人： 吴冯波 电话：主管部门： 太仓市科技局 申报日期：2009年5月8日 苏州市科学技术局 二ΟΟ九年制 立项依据 本项目国内外科技创新发展概况和最新发展趋势； 我国是乙型肝炎病毒（HBV）感染的高发区，慢性乙型肝炎又是我国肝硬化、肝功衰竭和原发性肝癌的主要危险因素。随着乙型肝炎病毒（HBV）全基因序列测定病毒株的增多，近些年人们开始根据生物系统发生学中的基因分类法建立HBV的基因分型技术和标准。对HBV进行基因分型有利于对HBV感染的流行病学、病因学和临床诊治进行更加深入细致的研究，现有研究表明不同亚型的HBV感染的临床病程和对治疗的反应都存在着一定的差异。 目前，国内外对HBV进行基因分型的方法可分为全基因序列比对和片段基因序列比对两大类。全基因序列比对是以生物系统发生学中的基因同源性为基础的，它主要是通过HBV全基因序列测定来进行基因分型，另外，也可应用对HBV全基因进行限制性片段长度多态性分析技术（RFLP）。片段基因序列比对是利用HBV中的代表性片段的序列类型来反映全基因序列的类型，主要技术类型有片段基因序列测定、RFLP、型特异引物（SSP）扩增法和型特异探针（SSO）检测法等。序列测定虽然结果准确可靠，但是由于其技术复杂、实验条件要求高和费用昂贵难以常规使用；RFLP技术相对简单，但是酶切位点易受基因变异影响，且遇混合感染或酶切不完全，会出现复杂条带，影响分型结果判断；应SSP法进行PCR扩增需要多个扩增管，相对费用也较高。 本项目研究一种全新的基于TRIFMA原理的HBV基因型检测方法，是国际上首个HBV基因型TRIFMA检测产品。该设计思想基于日本东芝总医院（Toshiba General Hospital）和免疫学研究所（Institute of Immunology）在这一领域的联合研究结果的基础上提出，但与原研究相比，本项目具有在检测结果准确性、检测方式和检测简便性方面均有显著改善，具有显著创新性。 本项目研究的目的、意义（突出说明对科技、经济和社会发展的作用）; 目前，中国在世界上属于乙肝病毒(HBV)感染的高发区,目前约1.3 亿人口为HBV携带者，慢性肝炎患者约2300万；乙肝成为我国当前和今后相当长时期内危害人民健康、阻碍社会经济发展、影响社会和谐和稳定的重要因素，已成为严重危害我国人民健康的公共卫生问题。近年来，随着乙肝疫苗的广泛接种，我国在乙肝防控方面取得了明显效果。但由于我国原有感染人群基数大、病毒传播方式特殊，乙肝防控形势依旧很严峻。高质量的诊断试剂是开展乙型肝炎临床诊断、治疗、流行病学调查、评估乙肝疫苗接种效果的前提和手段。目前，我国已研制开发了多种乙肝血清学诊断和分子生物学诊断试剂，这些试剂的广泛使用对我国的乙肝防治作出了重要贡献，但目前仍缺少一种可广泛应用于临床、准确、价廉的HBV基因分型试剂。 本项目利用单克隆抗体技术和本公司在时间分辨免疫荧光分析（TRIFMA）领域的技术优势，研制一种全新的基于TRIFMA原理的HBV基因型检测方法。该方法彻底克服了上述各种基于HBV-DNA检测原理的分型方法的局限性，具有快速、准确、操作简单、重复性好等优点，可应用于临床检测、流行病学调查和其它HBV相关研究，具有十分广泛的应用价值。HBV的基因型检测不仅与疾病预后直接相关，且与抗病毒药物的疗效密切相关，而耐药则是慢性乙肝抗病毒治疗失败的最重要因素。因此，HBV基因型检测对HBV感染者个体化治疗方案的选择、减少耐药突变株形成和药物交叉耐药具有非常重要的意义。本项目的开展，将为我国广大乙肝患者提供一准确、简便、能广泛适用于临床的HBV基因分型手段，为我国乙肝防治水平的提高做出贡献。 本项目研究现有起点科技水平及已存在的知识产权情况； 本项目是利用TRIFMA技术研制的HBV基因检测试剂基于更先进的TRIFMA检测平台，比日本免疫学研究所研制的HBV Genotype EIA相比具有