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甾体皂苷类成分分析综述 【1】概述【1】 甾体皂苷是一类由螺甾烷类化合物与糖结合的甾体苷类，其水溶液经振摇后多能产生大量持久性的似肥皂水溶液的泡沫，故称为甾体皂苷。主要分布薯蓣科、百合科、玄参科、菝契科、龙舌兰科等单子叶植物中。 甾体皂苷是自然界中分布很广的一种天然有机化合物, 这类物质多具有溶血及毒鱼、毒贝等生物作用, 过去主要用作甾体避孕药和激素类等药物的重要合成原料。然而, 越来越多的研究结果表明, 甾体皂苷具有广泛的药理作用和重要的生物活性, 如抗肿瘤、抗真菌、防治心血管疾病、降血糖、免疫调节等, 引起了全世界的关注。 关键词: 甾体皂苷；定性鉴别；含量测定 【2】结构特征及理化性质【1】 甾体皂苷大多为无色或白色无定形粉末，而甾体皂苷元多有较好的结晶形状。熔点都较高，苷元的熔点常随羟基数目增加而升高。甾体皂苷和苷元均具有旋光性，且多为左旋。甾体皂苷一般可溶于水，易溶于热水、稀醇，难溶于丙酮，几不溶于或难溶于石油醚、苯、乙醚等亲脂性溶剂。甾体皂苷元则难溶或不溶于水，易溶于甲醇、乙醇、氯仿、乙醚等有机溶剂。　 最常用的显色鉴定反应为醋酐-浓硫酸 （Liebermann-Burchard）反应，即在试管中将少量样品溶于乙酸酐，再沿试管壁加入浓硫酸，可出现黄-红-紫-蓝-绿色等变化，颜色变化较快，最后显蓝绿色。 甾体皂苷的乙醇溶液可与甾醇（常用胆甾醇）形成难溶的分子复合物而沉淀。甾体皂苷与胆甾醇生成的分子复合物的稳定性强于三萜皂苷，故可利用此性质进行分离。 甾体皂苷还可与碱式醋酸铅或氢氧化钡等碱性盐类生成沉淀。 取30 ml试品溶液，离心，取上清液，加到已处理好的C18小柱（先用甲醇6 ml，淋洗，再用水6 ml，洗去甲醇）上，用水6 ml 洗脱，弃去，再用80%甲醇洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇1 ml 使溶解，作为供试品溶液。分别取对照品溶液、阴性对照溶液按以上方法制得对照溶液、阴性对照溶液。照薄层色谱法（《中国药典》附录ⅥB）试验，吸取供试品溶液和对照溶液5 μl，分别点于同一硅胶G 薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水（15∶5∶1）的下层液为展开剂，展开，取出， 晾干， 喷以10%硫酸乙醇溶液， 在105℃加热至斑点显色清晰，分别置紫外灯（365 nm）下和日光灯下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，阴性无干扰。 【含量测定】 高效液相色谱法【3】： 色谱条件 C18分析柱( 4. 6 mm × 250mm，5 μm) ，流动相为乙腈-水，检测波长203 nm，柱温35 ℃，流速1 mL·min －1，进样量20 μL。在一定的洗脱条件下。在该条件下，观察标准品与样品的色谱。 对照品溶液制备【4】： 精密称取药品适量，用甲醇定容于量瓶中，配成终质量浓度分别为175，mg·L － 1的对照品溶液，0. 2 μm 滤膜滤过，备用。 供试品溶液制备 将药品粉碎，过40 目筛，精密称取10 g，置圆底烧瓶中，加入70 %乙醇250 mL，水浴回流3 h，过滤，取滤液，重复3 次。合并滤液，蒸去乙醇后干燥，得粉末。将粉末溶于250mL 甲醇，微孔滤膜过滤，即得。 样品测定 取药品，按照供试品溶液项下方法制备供试品溶液，按照色谱条件测定甾体皂苷的质量分数。 【1】匡海学，全国高等中医药院校规划教材中药化学，中国中医药出版社，2003，1:273---274。 【2】郑艳平，林壮民，蓝菊抗病毒口服液的薄层鉴别，广东省第二人民医院，2010，6：76--78。 【3】梁玉勇，刘振，高文远 ，满淑丽，HPLC 测定贵州不同产地的七叶一枝花中9 种甾体皂苷的含量，中国中药杂志，2012，7：2309---2313。 【4】王倩，程凡，刘呈雄，邹坤，吉祥草根茎中一个甾体皂苷的提取与含量测定，华中师范大学学报（自然科学版），2013，2：60----64。 补阳还五汤口服液 Bu yang huan wu tang kou fu ye 【处方】【1】 黄芪（生）120g 当归尾 6g 赤芍 5g 地龙 3g 川芎 3g 红花 3g 桃仁 3g 【制法】【2】 取处方药材144 g 以少量水浸润, 然后加15 倍量水煎并过滤, 滤液经离心( 4 000 r/min) 取上清液浓缩至规定体积加入澄清剂1. 7% 醇沉, 静置过夜, 离心( 4 000 r/min) , 取上清液挥散至无醇味, 浓缩至72 mL, 加入稳定剂,