二至天癸颗粒提高卵细胞质量和小鼠卵巢内IGF-1RmRNA表达量关系的研究.pdfVIP

全国第五次中医妇科学术研讨会 参考文献： (1)卞度宏《慢性盆腔疼痛概述》(J)实用妇产科杂志，1998．14(6)：283。 二至天癸颗粒提高卵细胞质量与小鼠卵巢内IGF-IRsRNA表达量关系的研究 连方1孙振高1穆琳2张建伟2刘延荷1张宁2孟茜1马风梅1滕依丽2刘海萍2 摘要 目的通过观察二至天癸颗粒对小鼠卵细胞质量、卵裂能力和颗粒细胞IGF—IRmRNA表达量的影 响，探讨二至天癸颗粒提高卵细胞质量的机理。方法90只小鼠分为6组，实验1组与对照I组观察排 卵后优质卵数目。实验2组与对照2组观察鼠胚卵裂率。用原位杂交的方法对实验3组与对照3组鼠卵 二至天癸颗粒提高卵细胞质量 (P0．05)。优质卵率与颗粒细胞IGF—IRmRNA表达量呈正相关。结论 的机理可能与提高颗粒细胞IGF一1RmRNA的表达量有关。 关键词 二至天癸颗粒；卵细胞质量；卵裂率；颗粒细胞；IGF一1R； 随着辅助生育技术的发展，越来越多的研究者认识到提高临床妊娠率与提高卵细胞质量有着至关重 要的关系。近代研究显示，卵母细胞对早期胚胎的代谢和蛋白质提供调控信息和能量，如何提高卵细胞 质量越来越受到研究者的重视。二至天癸颗粒经过长期临床实践证明有提高卵细胞质量的疗效，动物实 验也证明此方通过改善卵细胞质量而提高临床妊娠率…，本研究通过检测对小鼠卵颗粒细胞IGF—IRmRNA 表达量的影响，来探讨二至天癸颗粒提高卵细胞质量的机理。 材料与方法 、材料 (一)实验动物 健康昆明种小鼠(山东大学医学院动物中心提供)，8“9周龄，体重35±59，在 本室饲养l周后用于实验。根据小鼠阴道涂片动情周期的表现，选用动情间期的雌小鼠90只。雄性小鼠 h。 h，黑暗12 食和饮水，饲养室的温度保持在20±1℃，相对湿度约50％，自动控制光照12 menopausal (二)试剂人绝经后促性腺激素(HMG，human chorionic 宝生物化学制药公司产品)，绒毛膜促性腺激素(HCG，human With 生物化学制药有限公司生产)，0、3d胚胎培养液(P一1，Medium Serum SynthetiC Tabkets(MERCK公司)。 兔IgG—FITC(Incogene公司)，PBS (三)药物 莲、枸杞子、菟丝子、当归、白芍、川芎、熟地黄、制香附、炙甘草等药物组成)。采用人‘j动物的体表 面积计算法换算。以许文生氏公式计算人的体表面积，再以Meeh—Rubner氏公式计算359小鼠体表面积， 全国第五次中医妇科学术研讨会 采用直接计算法获得小鼠的每日用药量，即雌小鼠每日服用二至天癸颗粒0．29相当一般成人的每日服药 量。取一包二至天癸颗粒(129)稀释入30ml蒸馏水中，每日取0．5ml给小鼠灌胃。 二、方法 (一)排卵试验 连续每日下午6时灌胃给药(实验1组用二至天癸颗粒，对照l组用等量生理盐水)，第11日下午 20单位，次日上午10时脱颈 6时两组同时腹腔注射HMGl8单位，48小时后30只小鼠同时腹腔注射HCG 处死，解剖取出输卵管，在体视镜下用TB针划破输卵管壶腹部，收集被粘液团和颗粒细胞包裹的卵子， 评估卵细胞质量嵋1。 (二)卵裂试验 连续每日下午6时灌胃给药(实验2组用二至天癸颗粒，对照1组用等量生理盐水)，第11日下午 20单位，42小时后脱颈处死， 6时两组同时腹腔注射HMGl8单位，48小时后30只小鼠同时腹腔注射HCG 收集2细胞受精卵于含P-1液的四孔培养皿