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大鼠辅助性原位肝移植的体会.doc
【摘要】 目的 研究大鼠辅助性原位肝移植模型的手术技巧及术后并发症的预防。 方法 30只SD大鼠作供体。30只SD大鼠为受体。通过“袖套法”施行大鼠辅助性原位肝移植。 结果 24h存活率76%(19/25);周存活率56%(14/25)。 结论 熟练的显徽外科技术是模型成功与否的关键。
【关键词】 肝脏;移植;大鼠
Parital auxiliary orthotopic liver transplantation in rats
LONG Guang-hui, XIAO Ping, XIE Yong, et al. Department of Hepatobiliary Surgery,Peking University Shenzhen Hospital,Guangdong,518036
[Abstract] Objective To investigate the method and technique of parital auxiliary orthotopic liver transplantation in rats. Methods 30 cases of parital auxiliary orthotopic liver transplantation in SD rats were performed using cuf-tecnique and microsurgery method. The successful rate, operation time and complications were observed. Results The general successful rate was 90%, the survival rate of post-operation 24-hour and one week was 76%(19/25)and 56%(14/25)respectively. Conclusion Meticulous and skilled microsurgical technique is the key to successful operation.
[Key words]liver; transplantation; rat
近年来,辅助性原位肝移植因其手术创伤相对较小、供体来源比较容易获取以及术后不必长期服用免疫抑制剂等优点已经越来越多地受到临床医生的重视[1]。但是,该该移植方法目前也有其一定的局限。其中又以供肝与移植肝功能竞争导致移植肝萎缩最为明显[2]。因此,建立动物辅助性原位肝移植模型了解供肝与移植肝功能竞争的机理是解决这一难题的重要研究手段。70年代大鼠原位肝移植模型获得成功后[3,4]。原位肝移植的动物模型已经逐渐成熟并被实验研究广泛采用。但是,辅助性原位肝移植的动物模型尚不多见。本实验采用套管法,参考一些国内、外相关报道的方法,建立大鼠辅助性原位肝移植模型。
1 材料与方法
1.1 实验动物 SD雄性大鼠30只。体重180~400g,作供体;SD雄性大鼠30只,体重180~400g,作受体,购自南方医科大学实验室动物室。常温下饲养,喂固体饲料。饮自来水。供体体重小于受体体重约10g左右。
1.2手术过程 受体术前禁食12h,不禁饮水。术前5~20min。肌注阿托品0.03~0.05mg。采用氯胺酮麻醉,受体术中辅以持续低流量吸氧。
1.2.1供体手术 供体大鼠仰卧位。固定四肢,备皮及碘伏消毒,取腹部“十”字型切口,进入腹腔,将肠管移出腹腔外。自肠系膜静脉注入含肝素150U的生理盐水2mL,使大鼠全身肝素化温盐水保护,组织钳钳夹、牵引腹壁及剑突。充分暴露肝脏。
肝门区游离胆总管,剪开胆总管前壁。置入硬膜外导管,长约4mm,4-0丝线结扎固定。胆总管远端切断。切断镰状韧带、左三角韧带。8-O丝线缝扎左膈下血管,结扎、切断食道与肝脏之间的交通血管。切断右三角韧带及肝后的腹膜组织,顺序游离、结扎、切断右肾上腺血管、右肾血管,最后,游离肝下下腔静脉。
阻断腹主动脉远端,近端置人套管针。剪开膈肌。阻断胸主动脉,剪开胸内下腔静脉及肾下下腔静脉。以4℃肝素平衡液O~20 mL注入腹主动脉,同时,用4℃的生理盐水淋洗肝脏,直到肝脏完整切下。结扎、切断肝动脉。在左肾静脉汇人下腔静脉上方,切断肝下下腔静脉。分离、结扎、切断门静脉根部的三个属支(幽门静脉、脾静脉、肠系膜上静脉),于肠系膜上静脉汇人处下方切断门静脉,环状切断膈肌及胸内下腔静脉,取出供肝。
1.2.2供肝的修整及套管 供肝的修整在4℃的平衡液冰浴中进行。修剪多余的膈肌,肝上
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