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测定唾液淀粉酶的最适PH值 制作人：叶小晴 学号：201140095 班组：15-4 学院：护理学院 摘要：酶催化活性最大时相应的环境PH称为酶促反应的最适PH值。虽然不同酶的最适PH值各不相同，但大多数酶的最适PH值接近中性，本论文主要在一定浓度、温度等条件下研究唾液淀粉酶的最适PH值，从而知道唾液淀粉酶的最适PH值，进而了解影响酶的活性的因素。 关键词：唾液淀粉酶、最适PH值、活性 前言：生物体内的酶是对其特异底物起高效催化作用的蛋白质或核酸，酶是机体内最重要的生物催化剂。在不同PH条件下，酶分子的许多极性基团的解离状态不同，受到PH变化的影响，从而影响酶对它们的亲和力。PH还会影响酶的活性中心的空间构象，从而影响酶的活性，因而PH的改变对酶的催化作用影响很大。 材料与方法： 材料：唾液、磷酸二氢钠溶液、磷酸氢二钠溶液、碘液、蒸馏水、温水、试管、试管架、洗耳球、烧杯、胶头滴管、水浴箱、分光光度计、吸量管、坐标纸 方法：（1）缓冲溶液的配置：根据各个PH值的缓冲溶液（用量：ml）表1： PH值 5.8 6.0 6.2 6.4 6.6 6.8 7.0 7.2 7.4 7.6 7.8 8.0 磷酸氢二钠 0.40 0.62 0.93 1.33 1.88 2.45 3.05 3.60 4.05 4.35 4.58 4.74 磷酸二氢钠 4.60 4.39 4.08 3.68 3.13 2.55 1.95 1.40 0.95 0.65 0.43 0.27 蒸馏水 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 （2）唾液的获取：温的水漱口，将蒸馏水含于口中2min后吐于烧杯中，取5ml唾液20ml水配成1/5的唾液，从中取5ml的1/5的唾液再加入10ml水配成1/10的唾液。 （3）测量PH：取12支管，分别标上1~12，按下表操作： 管号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 1/5唾液 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 淀粉溶液 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.5ml缓冲溶液PH 5.8 6.0 6.2 6.4 6.6 6.8 7.0 7.2 7.4 7.6 7.8 8.0 蒸馏水 3.0 3.0 3.0 3.0 3.0 3.0 3.0 3.0 3.0 3.0 3.0 3.0 表2： 管号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 1/10唾液 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 淀粉溶液 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.5ml缓冲溶液PH 5.8 6.0 6.2 6.4 6.6 6.8 7.0 7.2 7.4 7.6 7.8 8.0 蒸馏水 3.0 3.0 3.0 3.0 3.0 3.0 3.0 3.0 3.0 3.0 3.0 3.0 3、分别加入两滴碘液 4、水浴加热 5、测量吸光度 6、作标准曲线图 本实验中,当唾液淀粉酶的活性最大时,淀粉被分解得最大,剩余的底物最少.A值最小，过酸或过碱均会抑制酶的活性，使之分解的底物减少，A值增大。由所作的曲线可知,唾液淀粉酶的最适PH值为6.6。当PH6.6时，唾液淀粉酶的活性随PH值的增大而增大，当PH=6.6时，唾液淀粉酶的活性达到最大，当PH6.6时，唾液淀粉酶的活性随PH值的增大而减小。 参考文献：《分子酶学》 陈惠黎 李文杰 编著 人民卫生出版社 《酶与酶工程及其应用》 孙君社 主编 化学工业出版社 《酶学》 郭勇 郑穗平 编著 华南理工大学出版社 《医用生物化学》 陈诗书 孔良曼 章有章 主编 上海医科大学出版社 《生物化学》高国全 主编 人民卫生出版社