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2017-08-16 发布于江西
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基因组学4.pdf

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4.1 DNA测序的方法第4章基因组测序化学降解法测序（Chemical degradation 4.1 DNA测序的方法 method ）链终止法测序（The chain termination 4.2 DNA序列的组装 method ） 4.3 基因组测序进展自动化测序（Automatic sequencing ）焦磷酸测序（Pyrosequencing ） 4.4 EST测序芯片测序几种最新的测序方法 1 2 化学降解法测序步骤化学降解法测序双链降解在选定的核苷酸碱基中引入化学集团，再用化合物处理，使DNA分子在被修饰的单链位置降解，根据片段的大小依次读取序列。电泳分离末端标记读序列核苷酸修饰 3 4 Maxam-Gilbert法所用的化学修饰技术化学法测序碱基特异修饰方法 pH 8.0，用硫酸二甲酯对N7进行甲基化，使C8-C9键对硫酸二甲酯 G 碱基裂解有特殊敏感性 pH 8.0，哌啶甲酸可使嘌呤环的N原子化，从而导致脱 A+G 嘌呤，并因此消弱腺嘌呤和鸟嘌呤的糖苷键 C+T 肼可打开嘧啶环，后者重新环化成五元环后易于除去 C 在1.5 mol/L NaCl存在时，可用肼除去胞嘧啶 5 6 1 序列的链终止法测序读取以单链DNA为模板，设计与之配对的引物，在DNA聚合酶的作用下合成新链，其中一种为