生物检测技术.ppt

* * 第九章 生 物 检 测 技 术 1、生物检测技术是利用生物体对被检测物质的特有反应而鉴定被检物质的质量和功效的方法。 2、生物检测的生物体主要是各种微生物和某些动物。 3、生物检测的范围主要包括：生物效价测定和安全性的试验。 第一节 生物检测的主要内容 生物检测的范围主要是生物效价测定和安全性试验。 一、生物效价的测定 1、效价是指某一物质（尤其是药品）引起生物反应的功效单位。 2、生物反应是指生物体对某一物质的特有反应。 二、安全性试验 1、毒性试验：是检测样品毒性大小的一种生物检测方法。常用动物进行试验。如小白鼠、家兔狗以致猴子等。 1）生物制品或生化药物毒性的大小常用半致死剂量LD50来衡量。 2）半致死剂量是指被试验动物中，死亡率达50%时的药物剂量。 2、局部刺激性试验：是将被检药物注射进生物体内，观察在注射部位是否出现炎症或产生过敏反应等局部刺激现象。 3、溶血试验：是检测药物是否引起红血球膜破裂而释放出血红蛋白。 4、热原试验：是检测药物中有没有使动物体温升高的致热性物质的存在。一般采用哺乳类动物如家兔、狗、猴子等进行检测。 5、过敏试验：是检测药物中有无引起过敏反应的物质存在的一种方法。 6、变异原试验：是检测药物或食品中有没有引起生物产生变异的物质存在。 第二节 抗 生 素 的 生 物 检 测 1、抗生素的生物检测法是利用抗生素对特定微生物的生长起抑制作用而进行检测的技术。 2、抗生素的生物检测法可用于已知抗生素的杀菌能力的测定和效价测定，也可用于检出未知抗生素的抗生性。 3、不同的抗生素采用的生物检测方法一般有稀释法和扩散法两种 一、稀释法 样品 稀释 培养基（固体或液体） 所选择的菌种 培养 观察微生物的生长情况（样品与标准抗生素相对照） 样品中抗生素的杀菌能力或效价 不同浓度 混合到 接种 适宜条件 测定 固体培养基：从生长的菌落数比较 液体培养基：从测定光密度来判断（OD值） 涂布 1）利用稀释法测定抗生素的效价，标品与样品的接种必须相同。 2）利用稀释法也可测出该抗生素的最低抑菌浓度和半致死剂量LD50。 二、扩散法：利用抗生素在琼脂培养基中的扩散作用，形成连续的浓度梯度，使试验菌在抗生素最低抑菌浓度范围内生长受阻而形成抑菌圈，从抑菌圈的直径测定抗生素效价的方法。 １、纸片－平板法 *