棉花枯萎病菌的血清学研究.pdfVIP

维普资讯 t997年第2期 植糟妆蕞 PLANTQUARANTINE viruses．1972No．(81) 4 陈燕芳等．侵染豆类的蚕豆萎鹰崭毒的丹离和鉴 2 Stubbs，LLJDepAgr．VE~oria．1947，46{323～ 定．植物检疫研究报告，1985 铀 2 5 翼仲兴等．植物崭理学报，1982．1264)38~41 3 好秀珍等．侵染花卉的蚕豆萎鹰病毒和马铃薯Y崭 5 田文会等．植物保护学报，1982．g(3)；153~156 毒的鉴巷 植物检疫研究报告，1990 {r7i} 棉花枯萎病菌的血清学研究 李启新 李祥 杜琦 邓善英 邓学农 陈长法 — r( 物蝴 266 献 系 ； 土 ． 摘要 本研究以棉花枯萎病菌公安菌株为材料，用D．Iannelli法提取菌丝孢子蛋白 抗原，按改进的J．E．Devay免疫方案制备抗血清。琼脂藏扩散测得效价达1／64，用琼脂藏 扩散、(比较)对流免疫电泳、间接ELISA及SPA—ELISA测定抗血清的特异性和灵敏度。 结果表明4种检测方法基本上均能鉴别到尖孢镰刀菌种的水平，但不能鉴别到种 下的 分类单位，4种方法检测所达的灵敏度依次为4．8625×10 ，6．078×10～，3．799×10一， 3．799×10mg×ml。除此之外，本研究对琼脂藏扩散法在真菌血清学上的应用上作了 摸索。 关键词 棉枯萎茵 血清堂 琼脂藏扩散 问接ELISA 橇 前言 费事，不能适应植物检疫快速准确的要求。 棉枯萎病是由尖孢镰刀菌萎蔫专化型 能否采用血清学方法检疫鉴定?前人 Fusariumo221sporumSchi．f．sDvasinfec— 曾有过探索，但在研究过程中，真菌的抗原 f (Atk．)SnyderetHansen引起的一 性差 ，抗血清的效价不高，而且特异性与 种棉花重要病害，主要借助于种子带菌远 灵敏度不一致等一直是困扰研究者的问 距离传病。但种子带菌率低，而且种子除传 题，本研究拟通过棉枯萎病菌的抗血清制 带枯萎菌外，还可传带半裸镰刀菌(F． 备技术和血清学检测技术的研究，探讨获 ∞ 靠c BerkRay)、木贼镰刀菌(F．卵一 得棉枯萎病菌的血清学检验鉴定方法为棉 uiseti(Corda)Sacc．)、串珠镰刀菌(F． 籽带菌的血清学检验打下基础，现将结果 moniliformeSheldon)和茄病镰刀菌(F． 报道如下： solani(Mart．)Sacc．)，有时也带有拟枝 1材料与方法 孢镰刀菌(F．sporotr~oidesSherb)、禾备 1．1 试验材料 镰刀菌(F．graminearumSchwabe)和燕 供试菌种见表1。 麦镰刀菌 ．aue,／a／7ceu~?．／(CordaexFr．) 日本大耳白兔购 自湖北省医学科学院 Sacc．)等 。用常规的形态学(如选择性培 动物饲养中心。免疫前耳静脉采少量血分 养基植选1号踟、植选2号∞)和致病性检验 离血清与棉枯萎病菌抗原蛋白作沉淀反应 鉴定方法，不仅准确性因人而异，而且耗时 试验，为阴性。 收藕日期|1996—05—2O．1996-08—25绉回 71